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背景与目的：在正常细胞，低剂量辐射（LDR）能增强细胞增殖能力与细胞活性，即兴奋效应；预先给予LDR可以减轻后续高剂量辐射造成的损伤，即适应性反应。而在肿瘤细胞，LDR能抑制肿瘤细胞生长并增强高剂量辐射对肿瘤细胞的杀伤作用。将LDR应用于肿瘤治疗中，既可以保护正常组织又可协同杀伤肿瘤，从而提高肿瘤治疗效果，这将为肿瘤的综合治疗探索一种新模式。过继性免疫效应细胞治疗是将肿瘤患者自身或异体的抗肿瘤细胞，在体外经细胞因子诱导、激活和扩增，再回输到患者体内，直接或间接杀伤肿瘤细胞，并提高机体抗肿瘤能力的一种疗法。然而，将LDR作用于这种免疫效应细胞，能否增强其活性，提高过继性免疫治疗效果，以及LDR诱导免疫增强效应的分子机制，目前尚未完全阐明。深入探讨LDR的免疫活性增强效应及其分子机制，将为LDR应用于肿瘤治疗提供科学依据。本研究观察LDR对恶性肿瘤患者外周血来源的NK细胞免疫活性的影响，检测经过低剂量辐射后NK细胞杀伤活性、杀伤相关细胞因子以及蛋白表达水平的改变，并从p38MAPK信号转导通路角度对其机制进行研究。方法：本研究首先分离并培养24例恶性肿瘤病人外周血来源的NK细胞，在培养前、后分别观察细胞形态及数量变化，并应用流式细胞仪检测表面特征CD3-CD56+的NK细胞比例的变化，了解NK细胞体外扩增能力；应用LDH细胞毒性试剂盒检测给予25、75、200和500mGy剂量辐射后NK细胞对恶性肿瘤细胞的杀伤活性变化，以及低剂量辐射后2、24和48h后NK细胞的杀伤活性改变；应用ELISA试剂盒检测给予不同剂量照射后，NK细胞培养体系上清液中细胞因子TNF-α及IFN-γ的分泌水平变化；应用Western blot法检测75mGyLDR后NK细胞杀伤相关蛋白FasL和perforin的表达；同时为验证LDR诱导NK细胞免疫增强效应的信号转导机制，加入p38MAPK信号通路抑制剂，再次进行NK细胞杀伤活性、细胞因子及细胞杀伤相关蛋白的表达。结果：1.经过14d体外培养前后对比检测表明，恶性肿瘤患者外周血来源的NK细胞可经体外培养并成倍扩增，约扩增110倍；2. LDR后NK细胞杀伤活性较未照射组显著增强，尤以75mGy剂量照射后培养24h的杀伤活性最强，最高达79.33%；3. LDR后NK细胞培养体系上清液中细胞因子TNF-α和IFN-γ的分泌水平均升高，尤以75mGy剂量照射后培养24h分泌水平最高，TNF-α的分泌水平达到(30.57±0.79) pg/ml，IFN-γ达到(15.61±0.53) pg/ml；4. NK细胞接受75mGy剂量照射后培养24h其杀伤相关蛋白FasL、perforin的表达量均显著增加；5.与未照射组比较，LDR后NK细胞杀伤相关细胞因子TNF-α和IFN-γ含量及蛋白p38MAPK、FasL、perforin表达水平均升高（p<0.05），且与杀伤活性呈正相关（p<0.05）。抑制p38MAPK信号通路激活后，NK细胞的杀伤活性、细胞因子TNF-α、IFN-γ及相关蛋白p38MAPK、FasL、perforin的表达量均下降。结论：1．低剂量辐射可诱导恶性肿瘤患者外周血来源NK细胞免疫活性增强；2．这种免疫增强效应的发生机制可能与激活p38MAPK信号转导通路密切相关。本研究的创新之处在于，证明LDR后NK细胞具有更显著的杀伤活性，且杀伤相关细胞因子及蛋白表达水平显著升高；证明LDR诱导NK细胞免疫活性增强效应机制可能与p38MAPK信号转导通路有关；提出将LDR应用于肿瘤细胞免疫治疗中，可显著增强体外培养免疫细胞活性，最终达到综合有效治疗肿瘤的目的。