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背景随着体外膜肺氧合(ECMO)技术的进步,其应用越来越广泛,目前已逐渐应用于移植领域内心脏死亡捐献(DCD)供体受损器官功能的修复及循环衰竭的潜在DCD供体院间转运。而ECMO再灌注DCD供肝过程中肠黏膜屏障功能的变化情况未见相关研究,其是否对供体器官的修复产生不良影响,有待深入研究。目的1、建立稳定的大动物体外膜肺氧合再灌注心脏死亡捐献供肝模型;2、观察体外膜肺氧合再灌注心脏死亡捐献供肝过程中肠黏膜屏障功能的变化,为进一步研究该条件下肠黏膜屏障功能的变化对肝功能的影响及其机制奠定基础,为ECMO相关机制的研究提供新的思路。方法1、选用与人体解剖结构较为相近的巴马小型猪16头作为实验动物,通过静脉推注氯化钾诱导心脏骤停,然后给予标准心脏复苏,30分钟后无心电活动及自主呼吸即显示复苏失败,5分钟不接触时间后宣布心脏死亡,由此建立标准的Maastricht II类DCD供体大动物模型,然后经腹主动脉-下腔静脉插管,连接ECMO管路灌注腹腔内所有脏器,建立起体外膜肺氧合再灌注心脏死亡捐献供肝的模型。2、建立16例体外膜肺氧合再灌注心脏死亡供肝的模型,分别于心脏死亡前、宣布心脏死亡后、ECMO运转2h、ECMO运转4h、ECMO运转6h时,获取小肠组织及血液标本,通过肉眼及经HE染色在光镜下观察不同时间小肠黏膜病理变化;酶联免疫分析法测定不同时间血清中二胺氧化酶(DAO)、肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、D-乳酸、内毒素水平;Western blot测定不同时间小肠黏膜上皮紧密连接蛋白(ZO-1、occluding、Claudin1),观察ECMO再灌注DCD供肝过程中小肠黏膜屏障功能的变化。结果1、16只巴马小型猪均成功建立体外膜肺氧合再灌注心脏死亡捐献供肝模型,模型成功率为100%。ECMO运转过程中血流动力学稳定。2、宣布心脏死亡后,各项指标恶化,均提示肠黏膜屏障功能损伤严重,随着ECMO运转至4h,各项指标均不同程度好转,说明肠黏膜屏障功能得到一定程度的恢复,当ECMO运转至6h时,部分指标反而恶化,提示肠黏膜屏障功能可能受到进一步损伤。结论1、实验中应用巴马小型猪成功建立了体外膜肺氧合再灌注心脏死亡捐献供肝的模型,为进一步研究ECMO运转过程中肠黏膜屏障功能的变化及其对肝、肾、胰腺等脏器的影响奠定基础。2、ECMO再灌注DCD供肝过程中,肠黏膜屏障功能变化如下:宣布心脏死亡后,肠黏膜屏障功能恶化严重,随着ECMO的运转至4h,肠黏膜屏障功能得到一定程度的恢复,但是随着ECMO运转时间至6h,肠黏膜屏障功能不再恢复好转,甚至恶化。