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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种急性传染病，主要表现以种猪的繁殖障碍和所有年龄猪的呼吸系统疾病为特征，是目前影响我国养猪业发展最重要的疾病之一。该病最早于1987年报道于美国南部，随后1990年在欧洲报道，我国于1995年首次分离到PRRS病毒。2006年我国首次发现高致病性PRRSV，其致病力能力显著增强，造成严重的经济损失，引起广泛关注。为了对PRRSV进一步了解，本研究开展了广东地区分离16株PRRSV的Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析，建立了RT-PCR和免疫组化的诊断方法，分析了广东分离TP株在猪体内的分布情况。主要研究内容包括： 1、广东地区分离16株PRRSV的Nsp2和ORF5的基因的遗传变异分析。为了解2010～2011年广东地区流行PRRSV毒株的遗传变异情况。采用RT-PCR方法扩增本实验室所分离16株PRRSV的Nsp2和ORF5的基因，并对它们进行克隆和测序，同时应用DNAstar、ClustalX2和MEGA5等软件进行序列比较及遗传进化树分析。结果显示，这16株PRRSV的Nsp2和ORF5基因的；氨基酸同源性分别为75.3％～100%和87.5%～100%，与国内高致病性PRRSV代表毒株JXA1的氨基酸同源性在分别为74.2%～98.2%和87.5%～99%。遗传进化分析发现，这16株PRRSV均属于美洲型毒株，其中15株病毒与以JXA1为代表的国内流行毒株处于同一分支，属美洲亚群Ⅰ，另外1株病毒与VR-2332和疫苗株MLV处在同一分支，属美洲亚群Ⅱ。说明2010～2011年广东地区仍广泛流行高致病性PRRSV，且存在经典疫苗毒株MLV。 2、分析了广东分离TP株在猪体内的分布。为进一步了解高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株(TP株)的致病机理，探讨其在猪体内的动态分布特点。本研究用TP强毒株接种90日龄健康仔猪，分别在其接种后7、14和21天各剖杀2头，并应用已建立的RT-PCR和免疫组化(IHC)方法对扁桃体、膀胱、肺、腹部淋巴结、回肠、肠系膜淋巴结、脑、胸腺、结肠、心、脾、空肠、胃、颌下淋巴结、肾、肝、十二指肠等组织及血清中的PRRSV进行检测。结果表明，人工感染猪均表现出临床上“猪高热综合症”一致的临床症状，通过RT-PCR和免疫组化的检测发现只在攻毒后7天猪体内检测到PRRSV，主要分布于肺脏和各淋巴等组织中，特别是肺脏阳性反应最明显，并在回肠固有层检测到PRRSV。试验表明，TP分离株致病力较强，且分布特点具有时间和组织特性。