背景:经过几十年的治疗进展，卵巢癌仍是世界上的一个难以攻破的课题。首先，卵巢癌发病率高，为妇科恶性肿瘤的第三位，但是死亡率却为首位。其次，卵巢癌疾病有其自身的独特特点，如起病隐匿，早期无明显症状、体征及可靠的辅助检查，出现症状时大多数已经进展到恶性肿瘤晚期。同时，卵巢癌肿瘤的生存率差，晚期卵巢癌患者，5年生存率仅为15-20％。可见，卵巢癌早期诊断的意义显得非常重要。此外，卵巢癌通过建立一系列免疫逃避机制来逃避宿主的免疫攻击，特别是晚期患者，体内免疫系统往往对肿瘤细胞是无能为力的。所以如若能探索出卵巢癌特异性表达的抗原，用于卵巢癌的早期诊断及针对其抗原的特异性免疫治疗，对卵巢癌的预后有非常重要的意义。近年来，被广泛接受和应用的血清标志物是CA125，但是实际上血清CA125对于卵巢癌的早期诊断的敏感率并不高，不到1/3，且特异性不好，假阳性率较高。因此，寻求更加灵敏及特异的一个或多个肿瘤标志物，显得非常重要。　　树突状细胞(dendritic cells，DC)是最强的抗原加工与提呈的专职抗原提呈细胞（antigen presenting cells，APC）。经过近年来的不断深入研究，其作用不断被发掘与利用。它就像整个免疫系统的控制者，对全部免疫细胞、因子等进行调节。此外，它还具有强大的攻击肿瘤的能力，其免疫攻击效应现已用于多种恶性肿瘤的治疗研究，如前列腺癌、黑色素瘤、乳腺癌、宫颈癌以及卵巢癌等，并取得了一定的效果。比较常见的方法为:用肿瘤特异性的抗原，刺激树突状细胞，使其激活T细胞及免疫系统，达到治疗、对抗肿瘤的目的。在卵巢癌方面，DCs不仅可以识别抗原，而且还可以诱导特异性杀伤卵巢癌的免疫效应，但治疗效果仍较差，未能明确的抗原为其中的一个重要原因。如果我们能通过其对肿瘤抗原的识别、捕获、加工、提呈能力，发现卵巢癌的特异性抗原。就可以通过其捕获、加工、提呈及诱导杀伤能力来早期发现和杀伤卵巢癌细胞，达到早期诊断及特异性治疗的目的。　　目的:研究卵巢癌细胞系SKOV3及人脐带血来源的树突状细胞的总蛋白种类及数量，为今后相关研究奠定基础。研究卵巢癌细胞相关抗原体外刺激人树突状细胞(DCs)膜蛋白表达的变化。验证筛选可以稳定表达的差异蛋白，并进行Western blot，ELASA验证。探讨其在卵巢癌血清及组织中表达的意义及是否具备成为卵巢癌特异性抗原及血清肿瘤标志物的前景。　　方法:由正常足月，无合并症孕妇的脐血，提取分离来源单个核细胞，经过粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)等四种细胞因子体外扩增培养14天分别获得实验组及对照组两组成熟树突状细胞DC，其中实验组增加卵巢癌细胞(SKOV3)肿瘤相关抗原(TAA)作为细胞因子外的另一刺激原参与DC的体外扩增培养。14天后收获各组细胞。流式细胞仪分析不同组别的细胞表型。抽提获得两组细胞的膜蛋白提取液，BCA法测定各组蛋白含量。通过电泳分析对比两组蛋白差异，最后取明显差异的条带经LC-MS/MS分析鉴定两组细胞蛋白表达的异同。　　培养、扩增并反复冻融获得卵巢癌细胞系SKOV3的总蛋白，并同时获得脐带血来源树突状细胞的总蛋白，卵巢癌患者血清中总蛋白。三组分别行质谱分析。分析并鉴定各组蛋白的表达差异，为以后实验中应用SKOV3细胞系及树突状细胞奠定基础。　　结合树突状细胞、卵巢癌细胞系SKOV3及SKOV3抗原刺激的树突状细胞的膜蛋白、总蛋白差异比较，挑选符合要求并稳定表达的差异蛋白，并进行Western blot，ELASA验证。　　结果:脐血单个核细胞在四种相关因子的作用下可培养出成熟的DC。体外养过程中卵巢癌抗原刺激的成熟树突状细胞组，细胞形态有所变化，细胞枝权增多。细胞表型分析显示实验组细胞更加成熟，拥有更多的提呈能力。抽提获得的细胞膜蛋白，BCA蛋白定量分析显示该组有更多的蛋白（树突状细胞膜蛋白十被提呈的卵巢癌抗原），最后经LC-MS/MS检测，结果分析表明经TAA体外刺激的成熟树突状细胞组DC较没有卵巢癌抗原刺激的DC组细胞膜蛋白表达差异为多个蛋白表达的差异。TAA作为本实验不同以往的刺激原，刺激树突状细胞成熟，并被树突状细胞所提取在细胞的表面。此外，卵巢癌细胞系SKOV3来源的蛋白与卵巢癌患者血清中来源的蛋白有差异。且都明显区别于树突状细胞来源的总蛋白。　　结论:卵巢癌抗原在体外被树突状细胞所提取，表达于细胞的表面。通过分离提取细胞膜蛋白，并且通过与无卵巢癌抗原刺激的树突状细胞的膜蛋白相比较，可以得出被树突状细胞所提呈的卵巢癌抗原。这些卵巢癌抗原可以作为卵巢癌疾病的早期诊断及相关的特异性治疗。此外，卵巢癌细胞系SKOV3作为一种常用的卵巢癌研究的工具，具有一定的局限性。不能完全代表所有卵巢癌患者的肿瘤抗原。