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研究目的：通过动物实验,建立慢性支气管哮喘小鼠模型,探讨正常组小鼠、哮喘组小鼠的支气管平滑肌中是否存在YAP(Yes-assoeiated protein)蛋白的表达,以期能为支气管哮喘的治疗提供新的作用靶点。方法：选取6-8周龄健康雌性SPF级BALB/C小鼠40只,随机分为哮喘模型组、正常对照组,每组20只；哮喘模型组小鼠：每只小鼠分别于第0,7,14天给予腹腔注射致敏液0.2ml致敏，第21天开始将所有小鼠置于自制密封箱中，应用空气压缩雾化器进行OVA雾化激发，每周3次，每次30min，持续雾化8周；正常对照组：给予相同剂量的生理盐水代替OVA进行致敏+激发。观察两组小鼠症状，于末次激发24h后，眼底动脉放血，颈椎脱臼法处死小鼠，回收血液，检测血清中总IgE及OVA特异性IgE含量；取左肺组织行HE染色观察肺组织普通病理学改变；应用免疫组织化学法检测肺组织是否有YAP蛋白的表达。结果：1.两组小鼠的症状：雾化激发后哮喘模型组小鼠出现呼吸急促、烦躁不安、抓耳挠腮、毛发倒伏、大小便增多、最后俯伏不动等症状，且随雾化激发次数的增加，上述症状开始出现的时间会越来越短，持续时间越来越长；正常组小鼠则相对较安静。2.与正常对照组比较，哮喘模型组小鼠血清总IgE及OVA特异性IgE的含量均高于对照组（P＜0.01），差异有统计学意义。3.哮喘模型组小鼠肺组织HE染色主要表现为支气管及血管周围大量炎性细胞浸润，其中可见嗜酸性粒细胞和淋巴细胞，气道平滑肌增生等改变。对照组小鼠肺组织无明显异常病理改变4.正常组中几乎检测不到YAP蛋白的表达；模型组的YAP表达位置主要在部分炎症细胞，且表达很弱，无统计意义。结论：1.哮喘模型组小鼠的血清中血清总IgE及OVA特异性IgE的含量均高于正常组，且肺组织HE染色的结果符合哮喘病理改变，故本实验所采用的造模方法正确，可用于本研究；2.正常组小鼠肺组织中无YAP蛋白的异常表达；3.模型组小鼠的肺组织中YAP蛋白表达位置主要在部分炎症细胞，且表达很弱，无统计学意义，支气管平滑肌内未见明显的YAP蛋白的表达。研究目的在现有的技术条件下，探讨开发一种在简单的实验条件下可以快速、准确的检测嗜肺军团菌的检测方法，以期能够为今后临床上快速明确嗜肺军团菌病原体的检测中提供一种新的思路。研究方法设计及合成对嗜肺军团菌标准DNA片段进行基因扩增时所需要的特异性引物；采用环介导等温核酸扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）及PCR技术对嗜肺军团菌的特异性DNA保守片段和其他对照菌种DNA分别进行扩增，以验证LAMP反应的特异性及敏感度；将LAMP反应扩增后的DNA产物与基因芯片进行杂交，观察是否可在芯片相应的区域出现杂交信号，以检测LAMP技术结合基因芯片技术在实验条件下检测嗜肺军团菌中的特异性。结果1.只有嗜肺军团菌DNA经LAMP反应后出现特异性的扩增条带；2.与PCR扩增基因的最低稀释倍数105相比，LAMP最低稀释倍数可达107，反应的灵敏度比PCR高100倍左右，故LAMP技术具有较高的敏感性；3.将经LAMP扩增后的基因产物与基因芯片杂交，芯片上只有嗜肺军团菌相应的区域可出现杂交信号，其他区域未见明显改变。结论1.因只有嗜肺军团菌标准DNA经LAMP反应后出现特异性的扩增条带，故LAMP技术在扩增相应基因时具有较高的特异性；2.相较于普通的PCR技术，LAMP技术在扩增基因时的反应的灵敏度比PCR高100倍左右，故LAMP技术具有较高的敏感性；3.LAMP扩增后的基因产物与基因芯片杂交后芯片上嗜肺军团菌相应的区域可出现杂交信号，余区域未见明显改变，所以LAMP技术结合基因芯片技术在实验条件下检测嗜肺军团菌中有较高的特异性。