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背景：子宫内膜的修复、再生与子宫内膜干细胞（hESC）有关，以维持其月经和孕育受精卵的功能。临床上有些疾病也可能与子宫内膜干细胞有关，如子宫内膜异位症(EMS)。有学者提出了EMS的干细胞起源学说，认为经血倒流将子宫内膜干细胞输送到子宫腔以外的地方，这些种子在适宜的微环境下发生粘附、增殖、浸润生长形成病灶。虽然有学者采用裸鼠进行人EMS模型的建立，但由于其免疫功能缺陷,而缺乏代表性。目的：本实验将初步分离人子宫内膜细胞（hEC），并利用人子宫内膜细胞移植于ICR小鼠的一侧子宫浆膜受损区，观察异种移植是否有病灶形成。方法:差速贴壁法和二次筛网法分离子宫内膜上皮和基质细胞，并分别进行低密度和挑克隆传代培养，并用流式细胞仪、免疫组化进行鉴定。将分离的hEC移植在ICR小鼠一侧子宫的浆膜损伤区，对侧子宫作为对照，实验分三组：第一组移植混合传代培养的hEC；第二组移植新鲜消化分离的hEC；第三组移植机械分离至0.5-1mm3大小的新鲜子宫内膜微组织。各组分别在2W、3W、4W处死小鼠。HE染色、免疫组化抗人ERα和CK鉴定，观察hESC在子宫浆膜受损区的定植和局部反应情况。结果：①差速贴壁和二次筛网过滤法均可初步分离上皮和基质细胞，上皮细胞呈椭圆形贴壁生长，细胞排列成铺路石样外观。基质细胞呈长梭形贴壁生长，细胞排列成漩涡状、放射状。细胞分别低密度培养后均有大小两种克隆形成，且都有几种不同细胞形态的克隆。上皮细胞大克隆挑克隆传代培养至P6开始出现老化现象，而基质细胞则传至P9开始出现生长停滞现象。免疫染色发现P5lower细胞CK-18阳性表达，ABCG2、CD90和波形蛋白表达阴性。细胞经混合传代培养后流式细胞仪检测发现SP细胞的比例逐渐减少至几乎没有。②混合传代培养的hEC移植后，2w、3w、4w处死小鼠均未见病灶形成，免疫组化分析未见抗人ERα和CK表达。移植新鲜消化分离的hEC与上组同期处死小鼠可见子宫表面有结节形成，体式镜下观察结节呈水泡状，HE染色可见血管及间质组织，未见腺体样结构，免疫组化染色未见抗人ERα和CK表达。移植新鲜子宫内膜微组织于3W后处死小鼠可见移植处子宫表面结节形成，体式镜下观察结节呈水泡状，表面布满血丝，HE染色可见血管及间质组织，未见腺体样结构。免疫组化染色见区域性抗人ERα和CK表达。结论：1.人子宫内膜含有SP细胞，这群细胞占约0-1.91%，在普通培养液和高氧环境下，传代培养过程中SP细胞逐渐丢失。2.人子宫内膜微小组织移植可能在ICR小鼠子宫获得短期存活生长机会。