棉花转录因子GhWRKY40-like和GhWRKY70在抗黄萎病中的功能研究

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棉花作为世界重要经济作物之一,其产量和品质受到黄萎病的严重影响。迄今为止,人们对棉花黄萎病并没有有效的控制方法和措施,因此棉花抗黄萎病研究成为棉花分子生物学研究的重点之一。目前,研究者关注最多的是由SA和JA信号路径介导的抗性路径在棉花抗黄萎病中的作用。有文献报道,JA介导的抗性信号路径对棉花抗黄萎病有正调控的作用,但SA信号路径也参与植物对黄萎病的抗性。研究棉花抗病机制并发掘抗病基因对棉花抗病育种具有重要价值。本研究对两个WRKY转录因子在抗病中的功能进行了初步鉴定,主要结果如下:研究发现Gh WRKY40-like和Gh WRKY70具有不同的组织表达模式,Gh WRKY40-like主要在花瓣中优势表达,而Gh WRKY70在根茎叶中均高水平表达。在外施SA和JA时,两个基因表现出不同的响应模式。Gh WRKY40-like受SA和Me JA诱导均呈上调表达,而Gh WRKY70受SA诱导上调表达,但是在Me JA处理后下调表达。在棉花接种黄萎病菌1h后,Gh WRKY40-like表达量显著上调,而Gh WRKY70则与对照无明显差异。通过遗传转化,获得了这两个基因的RNAi抑制表达转基因棉花。抗病鉴定结果发现转基因株系均表现出明显的抗性。同时检测了转基因株系中SA相关基因的表达量,结果显示其表达量升高,因此推测两个WRKY转录因子被抑制后,转基因材料对病原菌抗病水平提高可能是由于SA的信号路径被激活。
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