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背景随着全球糖尿病（diabetes mellitus,DM）发病率越来越高,糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）作为DM最重要的微血管并发症之一,发病率也随之升高,并成为终末肾脏病（end-stage renal disease,ESRD）的主要原因。Megalin/cubilin蛋白复合受体是肾小管上皮细胞上负责重吸收蛋白的主要结构,众多研究表明在DKD发病初期即可出现megalin/cubilin蛋白复合受体表达减少,并成为早期蛋白尿形成的重要原因。TGF-β1/Smads信号通路可以促进细胞外基质沉积于肾组织从而加快肾间质纤维化形成的过程,有研究表明TGF-β1/smads通路可以下调肾小管上皮细胞中megalin/cubilin蛋白复合受体的表达,通过干预TGF-β1/Smads通路的表达和激活可以抑制肾小管损伤及肾间质纤维化。目前中医药在治疗DKD方面效果显著,其中益肾化湿颗粒在改善早期DKD患者尿蛋白及肾功能方面具有很好疗效,但是,其治疗DKD的具体作用机制尚不明确。本研究拟通过动物实验观察益肾化湿颗粒对早期DKD小鼠模型体重、血糖、尿蛋白、尿NGAL、肾功能、血脂、肾脏病理、肾小管上皮细胞megalin/cubilin蛋白表达情况,并探讨其与TGF-β1/Smads信号通路的关系。目的观察益肾化湿颗粒对早期DKD小鼠模型血糖、尿蛋白、尿NGAL、肾小球基质指数、肾间质纤维化指数、megalin/cubilin蛋白及TGF-β1/Smads信号通路的影响,探讨其对DKD早期肾小管的保护作用及作用机制。方法将18只SPF级雄性db/db小鼠适应性喂养1周后随机分为3组:模型组（db/db）、西药组（db/db+缬沙坦）、中药组（db/db+益肾化湿颗粒）,每组6只;另外6只同品系非糖尿病db/m小鼠为正常对照组。中药组每日予益肾化湿颗粒5g/kg灌胃,西药组每日予缬沙坦13.33mg/kg灌胃,正常对照组及模型组给予等量去离子水灌胃。以上均每日一次,连续灌胃治疗12周。观察小鼠一般情况,定期测量体重、空腹血糖,12周后留取24小时尿液、血液及肾脏标本,称取肾脏质量,检测24小时尿蛋白、尿ACR、尿NGAL、生化指标,光镜下观察肾脏病理形态学改变,统计肾小球系膜基质指数及肾间质纤维化指数,免疫组化检测肾小管上皮细胞megalin/cubilin蛋白表达,Westernblotting法检测肾组织TGF-β1、Smad2/3及Smad7蛋白表达情况。结果1、体重和肾重db/db小鼠对比db/m小鼠体重明显升高（P＜0.01）,用药后西药组和中药组小鼠体重对比模型组无明显改变（P＞0.05）。db/db小鼠肾脏质量与db/m小鼠差异无统计学意义（P＞0.05）。2、空腹血糖db/m小鼠至实验结束时血糖仍保持较低水平,db/db小鼠对比db/m小鼠血糖明显升高（P＜0.01）。用药后西药组和中药组小鼠血糖对比模型组小鼠血糖差异无统计学意义（P＞0.05）。3、血液生化各组小鼠CRE、BUN水平进行对比差异无统计学意义（P＞0.05）,与正常组相比,模型组小鼠UA、TG、LDL水平明显升高（P＜0.01）;与模型组相比,中药组小鼠UA、LDL水平明显下降（P＜0.05）,TG指标水平变化无统计学意义（P＞0.05）;西药组小鼠LDL水平明显下降（P＜0.01）,UA、TG水平变化无统计学意义（P＞0.05）。4、尿蛋白及尿NGAL与正常组相比,模型组小鼠尿NGAL、24小时尿蛋白、尿ACR水平均明显升高（P＜0.01）;与模型组相比,中药组小鼠尿NGAL、24小时尿蛋白水平均下降（P＜0.01,P＜0.05）,尿ACR稍有下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）;西药组尿NGAL、24小时尿蛋白水平均下降（P＜0.05,P＜0.01）,尿ACR稍有下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）。5、肾脏病理光镜下观察肾脏病理改变,与正常组相比,模型组小鼠肾小球基底膜增厚、系膜基质增生,肾小球及肾小管间质轻微胶原纤维增生,中药组和西药组较模型组肾脏病理均有改善。与正常组相比,模型组肾小球系膜基质指数及肾间质纤维化指数明显升高（P＜0.01）,与模型组相比,西药组和中药组肾小球系膜基质指数及肾间质纤维化指数均明显下降（P＜0.01）。6、megalin、cubilin 蛋白表达与正常组相比,模型组小鼠肾小管上皮细胞上megalin、cubilin蛋白的表达均明显减少（P＜0.01）,与模型组相比,西药组和中药组小鼠肾小管上皮细胞上megalin、cubilin蛋白的表达均上升（P＜0.01,P＜0.05;P＜0.05,P＜0.05）。7、肾组织TGF-β1/smads通路的表达在Smad2/3及TGF-β1指标方面,模型组小鼠与正常组小鼠对比有上升趋势,西药组和中药组小鼠较模型组有下降趋势,在Smad7指标方面,模型组小鼠与正常组小鼠对比有下降趋势,西药组小鼠较模型组小鼠有上升趋势,中药组小鼠较模型组小鼠未见明显变化趋势。各组小鼠之间的差异无明显统计学意义（P＞0.05）结论通过实验发现,益肾化湿颗粒可以有效降低db/db小鼠血UA、LDL、尿NGAL、24小时尿蛋白指标,并改善小鼠肾脏损伤,降低肾小球系膜基质增生及肾间质纤维化,同时上调肾小管上皮细胞megalin/cubilin蛋白复合受体的表达,说明益肾化湿颗粒可以在一定程度上保护db/db小鼠早期肾小管损伤并抑制其纤维化进展,并且该作用的实现可能与TGF-β1/Smad2/3信号通路有关。