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微量元素氨基酸螯合物是现今研究最广泛的新型微量元素添加剂,其优秀的营养作用已为众多的添加效果试验所证实,但有关氨基酸螯合铜的研究报道较少,本课题以小鼠为动物模型,以赖氨酸整合铜和蛋氨酸螯合铜为代表进行了以下3部分试验,研究饲粮铜源和铜水平对小鼠铜营养状况及免疫功能的影响。 试验一,不同形式铜对小鼠营养与特异性免疫功能的作用-Ⅰ 昆明普通级雄性小鼠84只,饲以低铜基础饲粮20天后,分别添加以下铜源和铜浓度的饲粮:赖氨酸铜4.5mg/kg(以铜计,以下同)、赖氨酸铜45mg/kg、蛋氨酸铜4.5mg/kg、蛋氨酸铜45mg/kg、硫酸铜4.5mg/kg、硫酸铜45mg/kg,另设1个缺铜对照组,共计7个处理组,每处理3重复,用塑料笼饲养小鼠,每个处理的小鼠同笼饲养。在正式试验期第7天、14天、21天、28天,每重复选取1只小鼠,测定外周血T淋巴细胞百分比、血清IgG含量、血清铜锌超氧化物歧化酶和铜蓝蛋白活性、免疫器官指数及肝脏和脾脏铜含量。 试验二,不同形式铜对小鼠营养与特异性免疫功能的作用-Ⅱ 试验动物分组同试验一,进入正式试验期后,在每周第1天、2天、3天同一时间每重复选取1只小鼠,称重后每天按10mg/kg体重肌肉注射一次植物血凝素生理盐水溶液,并于试验第7天、14天、21天、28天称重后尾尖取血,姬姆萨-瑞氏染色,计算T淋巴细胞转化率,计算免疫器官指数,测定肝脏、脾脏铜含量。 试验三,不同形式铜对小鼠非特异性免疫功能的作用 试验动物分组同试验一,进入正式试验期后,在第7天、14天、21天、28天每重复选取1只小鼠,称重后按10ml/kg体重尾尖静脉注入4倍稀释的中华墨汁,注入墨汁后2min和20min分别从眼眶取血测吸光值,最后一次采血后立即处死小鼠,取肝脏和脾脏称重,计算矫正吞噬指数。 通过以上3个试验,研究3种铜源的不同添加水平对小鼠铜营养和免疫功能的作用。试验结果如下: (1)饲粮铜源对小鼠肝脏铜、脾脏铜和血清铜浓度没有显著影响,饲粮添加铜能提高小鼠脾脏铜浓度,并可显著提高血清铜浓度,当铜添加水平为45mg/kg时,可显著提高肝脏铜浓度。 (2)饲粮铜源对小鼠血清铜锌超氧化物歧化酶活性和血清铜蓝蛋白活性没有显著影响。饲粮添加铜能显著提高小鼠血清铜锌超氧化物歧化酶和铜蓝蛋白活性。 (3)氨基酸螯合铜能够促进添加铜21天-28天小鼠的脾脏发育,给缺铜小鼠饲粮添加铜能显著减缓小鼠胸腺退化和促进脾脏发育。 东北农业大学农学硕士学位论文一 (4)蛋氨酸铜能促进小鼠T淋巴细胞的增殖功能,补饲各种铜源均能显著提高小鼠 ANAE+T细胞百分比和 T淋巴细胞增殖功能。 (5)氨基酸赘合铜有提高小鼠血清IgG含量和单核细胞吞噬功能的趋势,饲粮中添加铜可提高小鼠单核细胞吞噬功能,并显著提高血清!吵含量。 (6)在营养和免疫各项指标上,45mthe铜添加水平与 4.sing/kg铜添加水平相比没有显著优势。