为研究脊尾白虾蜕皮抑制激素基因(mih)在卵巢和幼体发育中的作用,本文采用RACE技术从蜕皮间期脊尾白虾眼柄中克隆获得MIH-like基因全长1218bp的c DNA序列,开放阅读框编码120个氨基酸,包括41个氨基酸组成的信号肽和79个氨基酸组成的成熟肽,同源性比较分析发现,脊尾白虾MIH-like基因与日本沼虾和罗氏沼虾同源性最高,分别为87%和86%。荧光定量PCR分析结果表明,脊尾白虾MIH-like基因在眼柄中的表达量最高,在卵巢中的表达量最少,而在肝脏、肌肉、鳃和血细胞中不表达。该基因在脊尾白虾卵巢发育的各个时期均有表达,随着卵巢的发育,Ⅲ期时mih基因的表达量极显著低于其它时期(P<0.01),IV期时mih基因的表达量显著升高。mih基因在脊尾白虾溞状幼体发育各个阶段均有表达,溞状幼体Ⅰ期mih的表达量极显著高于其他各期(P<0.01),溞状幼体V期mih的表达量下降到最低值;研究结果表明,mih基因能够抑制脊尾白虾卵巢发育,且参与了幼体蜕皮生长的调控。为研究脊尾白虾性腺抑制激素基因(gih)在卵巢和幼体发育中的作用,本文采用RACE技术克隆获得脊尾白虾性腺抑制激素基因(GIH)c DNA全长1009bp的c DNA蜕皮间期序列,命名为gih基因。开放阅读框编码111个氨基酸,由信号肽(32个氨基酸)和成熟肽(79个氨基酸)组成。同源性比较和系统进化树分析:gih基因与热液口虾同源性最高为81%,且与热液口虾紧密聚为一支。Real-time PCR分析结果表明:gih基因在眼柄中的表达量最高,其次为腹神经节,在血细胞中的表达量最少,而在肝脏、表皮、肌肉和鳃中不表达;该基因在脊尾白虾卵巢发育的各个时期均有表达,随着卵巢的发育,Ⅲ期时gih基因的表达量极显著低于其它时期(P<0.01),IV期时gih基因的表达量显著升高。gih基因在脊尾白虾溞状幼体发育各个阶段均有表达,其总体呈现升高、下降、再升高的趋势,溞状幼体Ⅵ期gih基因的表达量下降并且达到最低值;在仔虾第一天和第三天gih基因表达量极显著高于幼体其它各期(P<0.01)。研究结果表明,gih基因能够抑制脊尾白虾卵巢发育,且参与了幼体蜕皮生长的调控。为研究脊尾白虾高血糖激素基因(chh)在卵巢和幼体发育中的作用,本研究克隆获得的脊尾白虾chh全长710bp的c DNA序列,开放阅读框编码142个氨基酸,由信号肽(割位点在Ala和Trp之间,由27个氨基酸组成)、成熟肽(74个氨基酸)和前体相关肽(33个氨基酸)组成。其二盐基切割位点为KR,成熟肽第12位上没有CHH家族Ⅱ型肽中所特有的Gly残基,chh基因与日本沼虾和罗氏沼虾的chh同源性最高,分别为82%和81%,且与日本沼虾紧密聚为一支。脊尾白虾chh成熟肽C-端为GK,由此确定为脊尾白虾的ES型CHH基因。Real-time PCR分析结果表明:chh基因在眼柄中的表达量最高,其次为腹神经节,在血细胞中的表达量最少,Real-time PCR分析结果表明:chh基因在眼柄中的表达量最高,其次为腹神经节,在血细胞中的表达量最少,该基因在脊尾白虾幼体生长各个阶段均有表达,溞状幼体在Ⅵ期chh的表达量极显著高于其他各期,溞状幼体生长到第Ⅳ期chh基因表达量极显著低于其他各期。幼体Ⅰ期到Ⅴ期chh基因的表达量低于仔虾。chh在脊尾白虾卵巢发育的各个阶段均有表达,随着卵巢的发育,chh的表达量在卵巢发育中后期时极显著高于其它时期,在成熟期时chh的表达量显著下降。研究结果表明,chh基因能够促进脊尾白虾卵巢发育,且参与了幼体蜕皮生长的调控。p H、盐度、氨氮是影响海水养殖虾蟹类生理生态的重要环境因子,可直接影响水生生物的存活、生长、蜕皮、繁殖和免疫活性。本研究发现,环境胁迫后该基因具有明显的时序性。p H6.5胁迫后24h和48h,眼柄和腹神经节中MIH-like基因的表达量较对照组均显著增加(P<0.05);4mg/L氨氮浓度组胁迫后12h和24h,眼柄和腹神经节中MIH-like基因的表达量较对照组均显著增加(P<0.05);盐度39胁迫后12h和24h,眼柄和腹神经节中MIH-like基因的表达量较对照组均显著增加(P<0.05),本研究结果表明脊尾白虾MIH基因参与了环境胁迫后的机体应激反应。