目的:1、通过开展薄层色谱法、聚合酶链式反应法以及液质联用法对蛇、猪、牛、羊、兔五种动物胆汁进行定性分析,为解决蛇胆汁掺伪的问题提供依据。2、建立了HPLC-CAD法,对蛇胆汁中牛磺胆酸钠、牛磺去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸钠和胆酸四种成分进行定量分析,为蛇胆汁质量标准的制订提供依据。方法:1、分别以牛磺胆酸钠和蛇胆汁对照药材作为对照,建立蛇胆汁的薄层色谱鉴别分析方法,快速鉴别蛇胆汁与其他动物胆汁。2、运用聚合酶链式反应法对蛇胆汁药材进行专属性鉴别。3、采用色谱联用法对蛇胆汁进行定性分析以找出蛇胆汁中特征性成分,并对其他动物胆汁进行成分分析,为下一步定量分析提供依据。4、建立HPLC-CAD法对蛇胆汁中牛磺胆酸钠、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺脱氧胆酸以及胆酸四种成分进行含量测定。结果:1、不同蛇胆汁供试品溶液中均含有牛磺胆酸钠斑点。猪胆汁中不含牛磺胆酸钠,牛胆汁与羊胆汁中除含有牛磺胆酸钠斑点以外还含有其他斑点且斑点的R_f值与蛇胆汁有明显差异。2、运用聚合酶链式反应法鉴别,较其他定性分析方法专属性强。3、通过UPLC-QTOF-MS法对几种不同动物胆汁进行比较分析,结果表明,所收集到的12批蛇胆汁中均含有5种共有成分,不同动物胆汁中成分差异较大。4、建立HPLC-CAD法对蛇胆汁中已知4种共有成分测定含量并对方法学进行验证。结果表明,此方法操作相对简便,灵敏度很高,适用于蛇胆汁定量分析。结论:本课题通过以上研究,能够快速对蛇胆汁与猪、牛、羊、兔四种动物胆汁进行鉴别。本实验所建立的方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等特点,可作为蛇胆汁药材质量评价的重要依据。