中西药联合应用对铜绿假单胞菌体外抗菌作用的研究

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目的:收集并分离临床来源的68株铜绿假单胞菌,研究铜绿假单胞菌的临床分布特点及对我院常用中西药物的耐药情况;研究中药制剂与抗菌药物联合应用对于抗铜绿假单胞菌的效果,分析有无协同抗菌作用;对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶检测和基因分型研究,对比检测结果探讨中药制剂抑制β-内酰胺酶的情况,并初步探讨中西药联合应用具有抗铜绿假单胞菌作用的原因。方法:用琼脂二倍稀释法测定我院常用的10种抗菌药物及双黄连注射液、热毒宁注射液、双黄连口服液、金振口服液和喜炎平注射液的对铜绿假单胞菌的MIC值;用微量棋盘稀释法,计算头孢他啶分别和双黄连注射液、热毒宁注射液、喜炎平注射液联合应用抗铜绿假单胞菌的FIC指数。采用头孢硝噻吩纸片初筛β-内酰胺酶,采用改良三维试验和表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶和金属β-内酰胺酶。聚合酶链反应(PCR)技术检测β-内酰胺酶耐药基因。结果:68株铜绿假单胞菌主要来源于呼吸内科和ICU,各占17.65%;50株来源于痰液标本。铜绿假单胞菌对庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐药率相对较低,分别为19.12%(13/68),19.12%(13/68)和5.88%(4/68);对其他抗菌药的耐药率在22.06%至67.65%之间;对1/2浓度的双黄连注射液、双黄连口服液和热毒宁注射液的敏感率超过了 75%。喜炎平注射液体外无抗铜绿假单胞菌作用。头孢他啶和热毒宁注射液联用抗铜绿假单胞菌,以相加(11.76%)和无关(58.82%)作用为主,以协同(10.29%)和拮抗(8.82%)为次。头孢他啶和双黄连注射液联用抗铜绿假单胞菌,以无关(36.76%)和相加(20.59%)作用为主,以协同(11.76%)和拮抗(16.18%)为次。头孢他啶与喜炎平注射液不宜联用。25株多重耐药铜绿假单胞菌中,3株产AmpC酶,占12%;20株产ESBLs,占比80%;1株同时产AmpC酶和ESBLs;另有3株铜绿假单胞菌的改良三维试验结果提示双黄连注射液可能抑制β-内酰胺酶中AmpC酶和ESBLs酶的产生。PCR结果显示TEM阳性7株,SHV阳性2株,其余基因均未检出。PCR提示双黄连注射液可能抑制TEM型基因起抗菌作用。结论:铜绿假单胞菌对庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星较敏感;铜绿假单胞菌对不同浓度的双黄连注射液和热毒宁注射液、双黄连口服液和金振口服液的敏感情况各不相同。喜炎平注射液在体外无抗铜绿假单胞菌作用。头孢他啶与双黄连注射液、热毒宁注射液联用后,具有协同抗铜绿假单胞菌作用。双黄连注射液可能通过抑制TEM型基因起抗菌作用。建议临床医生在治疗过程中根据药敏结果合理用药,效果不佳时可以佐以中药制剂以增强抗菌药物治疗的有效性。
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