维生素D与糖皮质激素联合治疗对哮喘小鼠的影响

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目的:  研究通过建立BALB/c小鼠哮喘模型,探讨维生素D(VD)与糖皮质激素的联合治疗对哮喘小鼠气道炎症及细胞因子水平的影响。  方法:  49只清洁级(SPF)雌性BALB/c小鼠,随机分成7组(每组7只):A组(对照组),B组(哮喘组),C组(VD组),D组(VD+大剂量地塞米松(大Dex)组),E组(大Dex组),F组(VD+小Dex组),G组(小Dex组)。哮喘组以卵清白蛋白+氢氧化铝(OVA-Al(OH)3)于实验第0、7、14天腹腔注射(i.P)致敏,于实验第21-23天连续以OVA滴鼻激发;对照组以生理盐水替代OVA;C、D、E、F、G组致敏、激发同哮喘组,激发前1h分别i.P VD、VD+大Dex、大Dex、VD+小Dex和小Dex。采用直接低倍镜下计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)及嗜酸性粒细胞(EOS)数;通过肺组织石蜡切片苏木素-伊红(HE)染色观察各组气道病理改变;用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测BALF中IL-4、IFN-γ及血清中IgE水平。  结果:  1.小鼠BALF中WBC和EOS计数变化  哮喘组、VD组BALF中WBC和EOS计数较对照组显著增加(P<0.05);VD组与哮喘组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。  VD联合Dex组、单用Dex组与哮喘组比较,WBC和EOS计数均显著降低(P<0.05),VD联合小Dex组分别与大Dex组、小Dex组间比较,均无统计学差异(P>0.05)。  2.小鼠BALF中IL-4、IFN-γ及血清总IgE水平变化  哮喘组中,IL-4和IgE水平比对照组明显升高,IFN-γ水平比对照组明显降低,均有统计学差异(P<0.05)。  VD组中,IFN-γ、IgE水平比哮喘组降低(P<0.05),IL-4水平与哮喘组无差异(P>0.05);VD+小Dex组IL-4水平的数值比哮喘组低,但无统计学意义(P>0.05);VD+小Dex组IgE水平比哮喘组低,但仍高于单用Dex组,均有统计学差异(P<0.05);VD+小Dex组及单用Dex组中IFN-γ水平明显高于哮喘组,且联合用药组较单用Dex组升高更明显,统计学比较均有意义(P<0.05)。  3.小鼠肺组织病理变化  HE染色见对照组肺组织气管壁完整,气道管腔内未见粘液栓,其周围未见或见少许炎症细胞浸润;哮喘组支气管黏膜皱襞增厚,上皮细胞脱落,杯状细胞增生,周围组织、血管及管腔内炎症细胞浸润;VD组较哮喘组炎症变化未明显减轻。联合用药组、单用Dex组比哮喘组炎症减轻,且VD+小Dex组比单用Dex组炎症细胞浸润减轻。  结论:  VD联合Dex或单用Dex可缓解哮喘症状,改善肺组织病理变化,调节炎症细胞因子IFN-γ和IgE水平,且VD联合小Dex干预IFN-γ水平高表达更明显,对肺组织炎症改变更明显,提示VD联合糖皮质激素治疗哮喘可能能减少激素用量。
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