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产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类重要的食源性病原菌,可引起水样腹泻、出血性肠炎(hemorrhagic colitis, HC)、溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome, HUS)等病死率高的疾病。牛等反刍动物是STEC的主要储存宿主。目前报道470多种血清型STEC可引起人类疾病,其中以0157：H7血清型为主。虽然STECO157:H7分离鉴定方法已经成熟,但目前尚无有效的针对所有非O157STEC菌株的分离培养方法。本研究在综合国外研究的基础上,建立了套STEC菌株分离鉴定方法。利用该方法,对我国不同宿主包括牦牛、猪、肉牛、旱獭及腹泻患者中STEC流行情况进行了调查,发现其非O157STEC菌株分离率分别为11.68%、6.18%、4.00%、2.47%及0.34%,表明非O157STEC在我国多种宿主动物及腹泻患者中存在。本研究首次重点对青藏高原特殊地理环境下,青海玉树牦牛中STEC的流行情况及菌株特征进行了详尽分析。通过stx双重实时荧光定量PCR检测,对728份采集于2012年6月-8月的牦牛粪便进行了检测,其中138份标本stx基因阳性(阳性率18.96%),从其中的85份标本中分离出128株STEC菌株(细菌分离培养阳性率11.68%)。我们对128株STEC分离株进行了血清分型、志贺毒素基因型及其亚型分析、致病相关毒力基因及黏附相关基因检测、PFGE分型分析。128株牦牛STEC分离株分为15种不同的O血清群和36种不同的O：H血清型,主要血清型为O8:H16、O2:H45、O117:H21、O78:H8、O8:H、Ont:H8。128株STEC中,stxl阳性的有53株,均为stxla亚型,95株stx2阳性菌株分为5个不同的stx2亚型(stx2a、Stx2b、stx2c、stx2d、stx2g)。128株分离株lpfAO157/OI-141、 lpfAO157/OI-154、lpfAO113、katP、toxB基因均为阴性,caeA、iha、efal、saa、paa、 cnf1、cnf2、astA、subA、exhA、espP阳性菌株数分别为2、87、2、66、13、13、24.44.66.36。PFGE将其中123株分离株分为67种不同的PFGE带型,菌株呈现出高度多态性。本研究首次对我国牦牛中STEC流行情况进行了调查,证实了牦牛也是STEC的重要宿主；通过对菌株特征的分析,阐明了牦牛作为STEC传染源在引起人类感染等公共卫生方面的意义。为进一步了解我国STEC分离株的致病性和进化关系,我们对不同来源的111株STEC分离株进行了多位点序列分型分析(MLST)。结果显示我国不同来源的STEC分离株均呈高度多态性,同一宿主来源的菌株具有相对较近的亲缘关系。通过与HUSEC及高致病性和流行血清型(026、O103、O111、O121、O145、 O157) STEC菌株MLST型别进行遗传进化分析发现,我国存在与高致病性和流行株相同或相近ST型别的菌株,结合菌株血清型和毒力基因特征,表明我国动物宿主携带的STEC中存在一定致病潜力的菌株。因此,我国应加强对不同动物宿主和食品中STEC菌株的检测和监测,发展有效的STEC菌株甄别分子标识,及时识别可能的新发致病株或流行株引起人类感染暴发的风险,提高对突发疫情的应对和处置能力。