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目的:
观察电针对萎缩性骨不连模型大鼠的治疗效应,并通过断端局部骨组织的β-catenin、P-p38、p38蛋白表达量的检测来探讨电针治疗改善萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合的作用机制,为下一步科研及骨不连的临床治疗提供思路。
方法:
采用手术骨缺损法制作萎缩性骨不连模型大鼠。将所有实验动物随机分为空白组(Control)、模型组(Model)、缺损局部电针治疗组(Local electro acupuncture treatment,LEA)、缺损远端电针治疗组(Distal electro acupuncture treatment,DEA)、缺损远端普通针刺治疗组(Distal acupuncture treatment,DA),每组8只。局部治疗选取距骨折缺损处上、下约1mm处,远端治疗选取“居髎”和“膝阳关”,分别持续治疗20d。治疗结束后拍摄X光片观察大鼠骨折断端影像学改变;HE染色观察骨折断端局部骨组织生长情况;蛋白免疫印迹实验检测局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平的变化;免疫荧光实验分析局部骨组织β-catenin蛋白阳性表达趋势。
结果:
1.影像学结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠分别显示出不同程度的促进骨折愈合状态,断端骨组织生长情况均有所改善,缺损处连续性增强,可见有骨痂及新骨的产生;与Control组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠骨折断端分别呈现出非完全程度的骨性愈合结果。
2.HE染色结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠骨折断端局部骨组织分别显示出不同程度的促进骨折愈合状态;与Control组相比,LEA组、DEA组、DA组断端局部骨组织未见成熟骨细胞及排列有序的致密板层骨出现;LEA组、DEA组分别与DA组比较显示出较高的成骨相关细胞数量及生物组织活性。
3.蛋白免疫印迹实验结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平均增加;与Control组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平均增加;LEA组、DEA组分别较DA组显示出较高的β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平;LEA组、DEA组相比,β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平无统计学差异。提示电针可能是通过调节Wnt/β-catenin、MAPK/p38信号通路发挥促萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合作用;且从进一步比较结果可以发现,电针对萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合的这种促进作用较缺损远端普通针刺治疗明显;而局部电针治疗与远端电针治疗作用无差异。
4.免疫荧光实验结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠局部骨组织分别显示出不同程度的β-catenin蛋白阳性表达增多;其中,LEA组、DEA组分别较DA组显示出较高的β-catenin蛋白阳性表达增多;LEA组、DEA组相比,β-catenin蛋白阳性表达无明显差异。
结论:
电针治疗可有效促进萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合;这可能是通过提高局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达量从而激活Wnt及MAPK信号通路来发挥促进成骨作用;且电针对萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合的促进作用较缺损远端普通针刺治疗明显,而局部电针治疗与远端电针治疗作用无差异。
观察电针对萎缩性骨不连模型大鼠的治疗效应,并通过断端局部骨组织的β-catenin、P-p38、p38蛋白表达量的检测来探讨电针治疗改善萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合的作用机制,为下一步科研及骨不连的临床治疗提供思路。
方法:
采用手术骨缺损法制作萎缩性骨不连模型大鼠。将所有实验动物随机分为空白组(Control)、模型组(Model)、缺损局部电针治疗组(Local electro acupuncture treatment,LEA)、缺损远端电针治疗组(Distal electro acupuncture treatment,DEA)、缺损远端普通针刺治疗组(Distal acupuncture treatment,DA),每组8只。局部治疗选取距骨折缺损处上、下约1mm处,远端治疗选取“居髎”和“膝阳关”,分别持续治疗20d。治疗结束后拍摄X光片观察大鼠骨折断端影像学改变;HE染色观察骨折断端局部骨组织生长情况;蛋白免疫印迹实验检测局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平的变化;免疫荧光实验分析局部骨组织β-catenin蛋白阳性表达趋势。
结果:
1.影像学结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠分别显示出不同程度的促进骨折愈合状态,断端骨组织生长情况均有所改善,缺损处连续性增强,可见有骨痂及新骨的产生;与Control组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠骨折断端分别呈现出非完全程度的骨性愈合结果。
2.HE染色结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠骨折断端局部骨组织分别显示出不同程度的促进骨折愈合状态;与Control组相比,LEA组、DEA组、DA组断端局部骨组织未见成熟骨细胞及排列有序的致密板层骨出现;LEA组、DEA组分别与DA组比较显示出较高的成骨相关细胞数量及生物组织活性。
3.蛋白免疫印迹实验结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平均增加;与Control组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平均增加;LEA组、DEA组分别较DA组显示出较高的β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平;LEA组、DEA组相比,β-catenin、P-p38、p38蛋白表达水平无统计学差异。提示电针可能是通过调节Wnt/β-catenin、MAPK/p38信号通路发挥促萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合作用;且从进一步比较结果可以发现,电针对萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合的这种促进作用较缺损远端普通针刺治疗明显;而局部电针治疗与远端电针治疗作用无差异。
4.免疫荧光实验结果显示:与Model组相比,LEA组、DEA组、DA组大鼠局部骨组织分别显示出不同程度的β-catenin蛋白阳性表达增多;其中,LEA组、DEA组分别较DA组显示出较高的β-catenin蛋白阳性表达增多;LEA组、DEA组相比,β-catenin蛋白阳性表达无明显差异。
结论:
电针治疗可有效促进萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合;这可能是通过提高局部骨组织β-catenin、P-p38、p38蛋白表达量从而激活Wnt及MAPK信号通路来发挥促进成骨作用;且电针对萎缩性骨不连模型大鼠骨折愈合的促进作用较缺损远端普通针刺治疗明显,而局部电针治疗与远端电针治疗作用无差异。