[研究目的]通过检测重度子痫前期和正常妊娠孕妇中孕期母血清的1,25(OH)2D3水平及分娩后胎盘组织的miR-21表达水平,探究二者与胎盘滋养细胞生物学功能的影响,以期了解二者与子痫前期的相关性,为子痫前期发病机制和治疗手段的研究提供新思路。[研究方法]1.收集2016年1月至2017年1月在昆明医科大学第一附属医院产科分娩的孕妇孕中期的血清和顺产终止妊娠后的胎盘组织,其中包括15例重度子痫前期(实验组)和15例正常妊娠(对照组)孕产妇。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测两组孕产妇胎盘组织的miR-21表达水平,采用ELISA法检测中孕期母血清的1,25(OH)2D3水平。2.不同浓度的1,25(OH)2D3刺激HTR-8/SVneo(HTR)细胞不同时间后,RT-qPCR法检测细胞miR-21的表达情况。3.MTT 实验检测 1,25(OH)2D3 和 miR-21 mimic/inhibitor 刺激 HTR 细胞后,对细胞增殖能力的影响。4.Transwell实验检测miR-21 mimic和miR-21 inhibitor单独转染细胞或者联合1,25(OH)2D3共同刺激细胞后,对细胞迁移和侵袭能力的影响。5.Westem Blot(WB)实验检测 miR-21 mimic 和 miR-21 inhibitor 单独转染细胞或者联合1,25(OH)2D3共同刺激细胞后,对VDR、CYP27B1、MMP9和EMT相关蛋白水平变化的影响。[研究结果]1:与对照组相比,实验组胎盘组织的miR-21水平升高(12.05±0.4215 VS 22.09±0.5296,P<0.0001),血清中 1,25(OH)2D3 水平降低(46.48±2.248 VS 39.1±2.341,P=0.0311)。2.1,25(OH)2D3可抑制HTR细胞miR-21的表达,且抑制效果在一定浓度范围内呈浓度-时间依赖性增强。3.1,25(OH)2D3和miR-21对HTR细胞增殖无明显改变。4.单独转染miR-21 mimic后可抑制HTR细胞迁移和侵袭能力,miR-21 mimic联合1,25(OH)2D3共同刺激细胞可减弱该抑制作用;单独转染miR-21 inhibitor后可促进HTR细胞迁移和侵袭能力,miR-21 inhibitor联合1,25(OH)2D3共同刺激细胞与单独转染miR-21 inhibitor相比,细胞迁移和侵袭能力无明显变化。5.单独转染miR-21 mimic后,E-cadherin的表达增加,Fibronectin、MMP9蛋白表达减少,单独转染miR-21 inhibitor则结果相反。miR-21 mimic联合1,25(OH)2D3共同刺激细胞后,与单独转染miR-21 mimic相比,对这三种蛋白表达的调控作用被逆转;miR-21 inhibitor联合1,25(OH)2D3共同刺激细胞后,与单独转染miR-21 inhibitor相比,这三种蛋白表达水平无明显变化。[实验结论]1.孕期1,25(OH)2D3水平的降低和miR-21表达的增加可能与子痫前期发病有关。2.1,25(OH)2D3可能通过抑制miR-21水平影响滋养细胞迁移和侵袭能力,进而参与调控子痫前期发生发展过程。