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几年前，一种新的由DSBs诱导产生的小RNAs—diRNAs被报道，这种diRNAs是通过RNA介导的DNA甲基化通路(RdDM)产生的，并且作用于DSBs修复。然而，在内源基因中diRNAs的生物合成和功能仍然是未知的。我们在拟南芥和水稻体内利用CRISPR/Cas9基因编辑技术诱导产生的diRNAs来探索其生物合成和功能。在被CRISPR/Cas9靶定的35S启动子诱导表达的GUUS报告体系中，检测到了21个碱基的小RNAs。我们发现聚合酶PolⅡ对于diRNAs的产生非常重要，但是对于转基因的修复没有作用。diRNAs的积累于转基因的表达量密切相关，并且CRISPR/Cas9靶定内源基因诱导DSBs时不产生diRNAs。我们的研究结果表明，diRNAs通过转录后基因沉默通路产生的，并且对DSBs修复不起作用。 在开花植物拟南芥中，DNA去甲基化是经由DNA糖基化酶ROS1家族通过碱基切除修复通路完成的。这些去甲基化酶切除甲基化的DNA，阻止目标基因和转座子的沉默。然而这些DNA甲基化酶如何被招募到甲基化区域的仍然是未知的。在此，我们利用RD29A-LUC体系鉴定出了一个可能在另一条通路参与去甲基化过程的抗沉默因子ROSX。