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近几年来,雾霾天气愈发频繁,严重影响人们的健康,已成为许多学者关注的热点。雾霾的主要成分是PM2.5(空气动力学直径≤2.5μm的大气悬浮颗粒物)。PM2.5可直接被吸入肺部,导致机体产生氧化应激反应和炎症反应,也可引起血压升高、动脉粥样硬化形成、凝血和抗凝系统失衡及自主神经系统功能改变等疾病。每年全球约有320万人因PM2.5而导致死亡,PM2.5成为全球健康的第6号杀手。雅安市位于四川盆地西部边缘,由于城市工业化进程不断加快,同时成都等周边城市的雾霾会飘入雅安,使得雅安出现雾霾天气增多,对人体健康构成严重的威胁。因此,本研究采集雅安市雨城区PM2.5,研究其对人支气管上皮细胞(16HBE)毒性及氧化应激的影响,为PM2.5生物学功能,及其相关疾病的预防和治疗提供科学的理论依据。本试验用TE-6070-2.5型大流量采样器和长方形石英纤维滤膜(QFF)从雅安城区收集PM2.5,并进行成分分析。通过有机试剂(甲醇:二氯甲烷=1:1)超声提取有机成分,并用去离子水超声提取水溶性离子成分,最后将其混合作为试验用PM2.5样品,用1640完全培养基配制不同浓度的PM2.5悬液(12.5、25,、50和100 μg/mL)作为剂量组,用1640完全培养基配作为空白对照组,在5%CO2、37 ℃饱和湿度下处理人支气管上皮细胞(16HBE)24h后,胰酶消化收集细胞;采用MTT法检测细胞毒性,PI染色法检测细胞周期分布情况,以及Hoechst3328染色法镜下观察细胞核的凋亡形态;利用流式细胞术和分光光度法,分别检测ROS水平,MDA含量和SOD活性。结果显示,PM2.5中的OC浓度为19.8 ± 11.9 μg/m3,EC浓度为1.26 ± 0.76μg/m3,各离子浓度分布趋势为SO4,>NO3->NH4+>K+>Cl->Na+>Ca2+>Mg2+。各金属元素浓度分布情况为 A1>Fe>Zn>Mn>Pb>Ba>Cu>Cr>Ti>Sr>As>Cd>Ni>Mo>V。在细胞试验中,16HBE细胞经25~100μg/mLPM2.5处理后,细胞的生长受到不同程度的抑制,抑制率分别为11.39%、35.44%、73.38%。利用流式细胞仪分析细胞周期发现,100μg/mL的PM2.5可使16HBE细胞阻滞于G2/M期,导致细胞有丝分裂受阻,但PM2.5浓度较低时无显著性影响。在Hoechst33258染色试验中,16HBE细胞核形态随着PM2.5浓度的增加而出现更严重的变形,导致细胞凋亡。与PM2.5共孵育后的16HBE细胞,ROS水平明显增加,尤其是PM2.5浓度为50~100μg/mL时,与对照组相比,差异极显著(p<0.001)。进一步试验发现,PM2.5可使细胞内总SOD(T-SOD)和Cu/Zn-SOD的活性降低,当PM2.5浓度最大(100 μg/mL)时,抑制率分别为24.6%和37.7%,较对照组差异分析都为极显著(p<0.001)。同时,MDA含量增加的比例在50 μg/mL组和100 μg/mL组显著增加。上述研究结果表明,雅安城区PM2.5对16HBE细胞有明显毒性作用,并诱导其产生较强的氧化应激反应。这些数据说明雅安城区PM2.5对人体健康构成了潜在的威胁,有助于人们提高环境保护意识。