对甲基对硫磷的接触、效应和易感性生物标志物开展研究,不仅有利于深入研究甲基对硫磷的毒性作用,加强对接触者的健康监护和中毒防治,对有机磷化合物的安全评价及保护劳动者健康具有重要意义,而且对其它有机磷农药的相关研究也有借鉴和推动作用.该研究分三部分进行,报告如下:1接触生物标志物的研究为探索建立甲基对硫磷的免疫测定方 法,首先合成甲基对硫磷的人工抗原,制备单克隆抗体,建立酶联免疫分析法,并应用于甲基对硫磷生产工人及急性中毒动物模型体内毒物含量的检测.1.1甲基对硫磷人工抗原的合 成及鉴定M1605-BSA免疫新西兰兔10周后,双向琼脂扩散和间接ELISA法检测,证明得到了高价且具有较好特异性的多抗血清,表明他们成功合成了甲基对硫磷的人工抗原,为其免疫分析方法的建立提供了条件.1.2甲基对硫磷单克隆抗体的研制及鉴定对杂交瘤细胞株G12进一步研究发现,该杂瘤细胞株的染色体数为99-108,其单克隆抗体分类为IgM,该Mcab的亲和力常数为1.67×10<5>l/mol,且具有较好的特异性.1.3甲基对硫磷酶联免疫分析方法的建立及初步应用该研究首次应用酶联免疫法检测血清中甲基对硫磷,初步认为此法作为急性M1605中毒时的接触生物标志物,值得临床验证,在M1605低剂量长期接触时作为接触生物标志物,值得临床验证,在M1605低剂量长期接触时作为接触生物标志物的价值尚待进一步探讨.2效应生物标志物的研究首先通过动物和离体细胞实验,比较两类胆碱酶抑制制剂甲基对硫磷和毒扁豆碱及相关神经递质乙酰胆碱对免疫功能的影响,进一步明确甲基对硫磷的免疫毒性作用,并从整体、细胞和分子水平探讨其免疫毒性的机制.本研究成功的合成甲基对硫磷人工抗原,在国内外率先研制出了高特异性和高亲和力的单克隆抗体,建立了ELISA分析方法 并用于甲基对硫磷染毒动物和接触工人血清内毒物含量的检测,评价了作为其接触生物标志物的可行性.探讨了M1605的免疫毒性作用,首次提出了其免疫毒性作用并非通过抑制胆济黾犹迥谝阴5钏拢岢鯩1605可能对免疫系统具有直接作用的假说,并 筛选出了CD<,4>/CD<,8>等效应生物标志物.同时还率先探讨了PON1基因多态性与M1605对接触者免疫毒性等易感性的关系.同时还率先探讨了PON1基因在192位点多态性可能是M1605易感性的生物标志物之一.