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目的： 构建体外煤焦沥青烟提取物(Coal tar pitch extracts，CTPE)诱导人支气管上皮细胞（Immortalized human bronchial epithelial，BEAS-2B）恶性转化模型，探究恶性转化细胞的蛋白差异表达，为肺癌早期筛查的潜在生物标志物研究提供实验依据。 方法： 1.以CTPE作为染毒物诱导BEAS-2B细胞体外构建细胞恶性转化模型，根据前期研究结果，苯并(a)芘[benzo(a)pyrene，B(a)P]设为阳性对照组，染毒浓度为5μg/ml;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)设为溶剂对照组，染毒浓度为1.5‰;CTPE设为实验组，染毒浓度为15.0μg/ml。通过细胞形态学观察、划痕实验、细胞增殖活力实验、平板克隆形成实验及细胞周期来判断细胞是否发生恶性转化。 2.采用全蛋白串联质谱标记(Tandem Mass Tags，TMT)定量蛋白质组学技术检测经B(a)P及CTPE诱导BEAS-2B恶性转化差异表达蛋白。 3.生物信息学方法筛选差异表达蛋白。 结果： 1.体外恶性转化细胞模型的建立 Cell Counting Kit-8(CCK-8)实验确定CTPE的半数抑制浓度(median inhibition concentration，IC50)约为150.4μg/ml，取10％的IC50（约15.0μg/ml）作为后续染毒浓度。CTPE、B(a)P组20代、30代及40代细胞与溶剂对照DMSO组细胞相比出现细胞边界不清，形态各异，胞腔内出现空泡，细胞膜肿胀变形，体积增大，轮廓模糊，细胞核出现畸变，核碎裂等特征。划痕实验检测细胞迁移能力，结果显示B(a)P、CTPE染毒细胞迁移距离均大于DMSO溶剂对照组细胞(均P＜0.05)。CCK-8增殖活力实验检测细胞增殖能力，结果显示CTPE、B(a)P组30代及40代细胞吸光度值均大于DMSO组（均P＜0.05）;随着代数增加，细胞增殖活力增强(均P＜0.05)。平板克隆形成实验结果显示，B(a)P、CTPE组细胞克隆形成数均高于DMSO组(均P＜0.05);随代数增加，克隆形成率也增加(除CTPE20代，均P＜0.05)。流式细胞技术检测细胞周期变化，B(a)P、CTPE染毒后20、30、40代细胞G1期细胞百分率明显低于相应的DMSO溶剂对照组(均P＜0.05);B(a)P、CTPE染毒后20、30、40代处于S期细胞比例均高于DMSO组(均P＜0.05);B(a)P30、CTPE30、B(a)P40、CTPE40组细胞G2期细胞百分率明显低于相应的DMSO溶剂对照组（均P＜0.05）;且B(a)P、CTPE染毒30、40代细胞与0代细胞相比，周期各时相百分率差异均有统计学意义(均P＜0.05)。 2.恶性转化BEAS-2B细胞差异表达蛋白检测结果 以差异倍数(Fold change)大于1.2，P＜0.05为标准进行差异蛋白质筛选，与DMSO40代相比，B(a)P40代中共测出392种差异表达蛋白，其中表达上调的有273种，下调的有119种;CTPE40代中有107种差异蛋白表达，有74种表达上调，33种表达下调;其中HCAR2蛋白表达上调1.331倍，可能促进细胞恶性转化。ARHGDIA蛋白表达下调0.832倍，可能促进细胞迁移和侵袭。 结论： CTPE可诱导BEAS-2B细胞发生恶性转化，随着染毒代数增加，细胞增殖能力增强，细胞周期改变，细胞恶性程度增加。蛋白表达谱发生改变，CTPE40代中有107种差异蛋白表达，有74种表达上调，33种表达下调;其中HCAR2蛋白表达上调1.331倍，可能促进细胞恶性转化。ARHGDIA蛋白表达下调0.832倍，可能促进细胞迁移和侵袭。