前言 随着人们生活方式的改变及社会老龄化的到来，动脉粥样硬化的发病率呈逐年上升趋势，动脉硬化导致的冠状动脉及周围动脉的狭窄和闭塞常常危及病人的生命或导致截肢致残。利用自体静脉进行旁路转流手术是重要而有效的治疗手段，迄今自体静脉仍是应用最多，疗效最佳的移植材料。然而移植静脉的狭窄使移植血管远期通畅率仅为40％～60％。 因此，对移植血管狭窄的发病机制及其防治的研究，是进一步提高临床疗效的关键。目前认为移植静脉的内膜增生是移植血管狭窄的主要原因，是血管平滑肌增殖、迁移的结果。放射线的抗增殖作用已在减少肿瘤生长方面应用了多年。它非选择性地杀死分裂增生的细胞，使其染色体破坏，已被证实在调节创伤愈合和疤痕形成及其它临床应用方面有效。许多动物实验和初步临床研究已证明血管内放射性同位素治疗，通过抑制SMC的增殖而减少新生内膜形成，又通过减少胶原和基质合成，或者使残余斑块和血管中膜变薄，而有助于改善后期血管重塑。抑制内膜增生的放射线目前多用两种：γ射线和β射线，γ射线射程较长，能适应较大直径的血管，但其近距离组织生物效应较差，血管壁达到所需抑制内膜增生剂量的照射时间长，且γ射线穿透力强，辐射危害影响大，在治疗时需要特殊的防护。β射线放射源对近距离组织生物效应较好，血管壁达到所需照射剂量时间短，β射线穿透力弱，治疗时辐射危害影响小，可在普通治疗室使用。目前研究更倾向于应用β射线来预防血管再狭窄。本实验利用液相³²P产生的β射线照射移植血管内膜，观察β射线局部照射对移植血管内膜增生及血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。 实验材料及方法 1．放射源的选择： 医用放射源磷酸钠产P，中国原子能科学研究院同位素所生产厂产生纯p射线，半衰期为14．5天，最大能量为1．7MeV，平均首量为0．69MeV，剂量浓度为smCVInl。 2．动物模型的建立： 建立64只大鼠自体静脉移植模型，随机分为单纯自体静脉移植组（对照组）和’中局部照射组各 32只。每组动物按取材时间随机分成4个亚组：术后3＊上 天，每亚组8只。应用显微外科技术，取大鼠颈总静脉侧支0．scm，将移植静脉段于吻合前内膜外翻，置于液相’中中照射内膜15－20分钟，照射时间根据平面源吸收剂量丰公式计算订一A＊1770乃)吸收剂量为 20GY，后取出静脉段生理盐水冲洗，回翻内膜，切断同侧颈总动脉，应用n－0无创缝合线将静脉段端端吻合于同侧颈总动脉。单纯静脉移植组的处理除不进行’中照射外，其他处理与照射组相同。 3．病理组织学检查：各组动物分别按规定天数全麻取下移植静脉段，10％中性福尔马林液固定过夜，每个标本均作HE染色、弹力纤维染色JCNA、产＼hcf一二人ax免疫组化染色瞩ABC法X’fUNEL法检测VSMC凋亡。应用光学显微镜和计算机图像分析系统分析测定：内膜厚度＊UNEL、PCNA、产＼hcf－2、bax免疫组化切片，计算阳性细胞百分比。两组之间的数据如。S)分析采用成组t检验、方差分析和完全随机区组设计分析方法。 ·2· 结 果 各组镜下主要均见移植静脉的内膜增厚，以平滑肌细胞瞩MC)的增生和基质沉积为主，且内膜增殖以7天最为明显。与照射组相比，对照组内膜明显增厚。移植静脉段的内膜平均厚度：3天，对照组与照射组无明显差异（P＞0．05入 7、14在8天，照射组明显低于对照组师＜0．05人 PCNA阳性片示，照射组较对照组于7＊ 天受到明显抑制h＜0．of人 TUNEL法示，内膜 SMC的凋亡百分比7天增高／ 天达最高值，28天有所下降但仍高于7天；照射组凋亡受到明显促进／ 天两组差异显著h＜0．of人产’的表达 7天较 3天增高／ 天下降，两组间无明显差异h＞0．05厂baX／ bCI－2的表达，7＊ 天较3天增高，28天下降，14天照射组高于对照组，两组间有明显差异h＜0．05人 讨 论 平滑肌细胞的增生、迁移在自体静脉移植术后再狭窄中起主要的作用，Vitali Verin等在兔的骼动脉球囊过度扩张损伤至再狭窄模型中应用”Y印射线）照射，得出 18Gy是首选的抑制新生内膜增生及SMC增殖的有效剂量。Washman等用”Sr／”Y印射线)对猪的动物模型照射，得出 28 Gy为最佳有效抑制剂量。初期临床研究，kinglll等进行了 BE盯（Beta ene哈e restenosis rail）研究，即 p能量再狭窄试验，评价产生 p射线的产Sr／”Y)放射源血管内照射的可行性，在pCA术后再狭窄的病人中进行放射治疗，治疗时间不超过 3．5分钟，后期随访，管腔狭窄平均仅 0．05 rum，狭窄指数为4％，提示低剂量p射线治疗是安全有效的。CMer等研究’中放射性同位素支架对猪冠状动脉再狭窄模型的影响，具有放 ·3· 射性活度的支架植人后内膜与中膜的细胞密度均减少，内膜的细 胞构成减少K0％－90％对中膜细胞减少更明显，提示新生内?