【摘 要】
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单克隆抗体在肿瘤的临床治疗中已经显示了巨大的潜力，寻找新的癌细胞特异表面抗原作为抗体类药物靶标是关键步骤之一。 F1F0-ATP合成酶对肿瘤细胞中ATP合成起重要作用。在
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单克隆抗体在肿瘤的临床治疗中已经显示了巨大的潜力，寻找新的癌细胞特异表面抗原作为抗体类药物靶标是关键步骤之一。
F1F0-ATP合成酶对肿瘤细胞中ATP合成起重要作用。在正常人体组织中，F1F0-ATP合成酶主要在线粒体内膜上定位，但也有少量存在于内皮细胞的细胞膜上。相对而言，很多肿瘤细胞超量表达F1F0-ATP合成酶，并大量定位于细胞膜上。因而肿瘤细胞膜上的F1F0-ATP合成酶是一个潜在的抗肿瘤药物靶标。
本研究探索了人F1F0-ATP合成酶中暴露于细胞膜表面的alpha与beta亚基作为抗肿瘤药物作用靶点的实用性。通过选择beta亚基构建表达克隆，表达纯化了beta亚基蛋白，并以此为抗原获得了国内首株抗人F1F0-ATP合成酶beta亚基的单克隆抗体杂交瘤10G6。在此基础上，采用嵌合抗体构建方法对其进行人源化基因工程改造，并在CHO-DG44细胞中实现人鼠嵌合抗体的表达。筛选后获得持续分泌抗人beta亚基人鼠嵌合抗体的稳定转染细胞株，为靶向人beta亚基的肿瘤免疫治疗提供了必要的前期物质基础。
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