【摘 要】
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脂肪酸在小球藻藻粉中的含量约为20%-40%,有着巨大的开发潜力。自养小球藻培养的问题关键在于难以实验高密度大规模培养。而异养小球藻可以在无光照条件下生长于有机物溶液中,大
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脂肪酸在小球藻藻粉中的含量约为20%-40%,有着巨大的开发潜力。自养小球藻培养的问题关键在于难以实验高密度大规模培养。而异养小球藻可以在无光照条件下生长于有机物溶液中,大幅度提高了小球藻的生长速度,能够获得很大的藻生物量。因此本文就筛选异养小球藻及对其培养条件的优化,以及对其重要产物脂肪酸的提取进行了研究,以期为实现小球藻的工业化大规模生产和应用提供有价值的参考。 在天然水体中筛选得到1株能高速异养生长的藻株WLZ-H。用扫描电镜对藻株进行细胞形态分析,并结合分子生物学鉴定,初步确定藻株WLZ-H属于小球藻属(Chlorella sorokiniana)。对藻株进行环境因子单因素试验,发现温度、KNO3和葡萄糖的浓度对藻株生长影响显著;异养小球藻对初始pH值适应范围广。实验最佳生长条件下,藻株270、藻株WLZ-H每升溶液中培养9天能够获得最大藻粉干重分别为5.250g、5.337g。藻粉中粗脂采用乙醚/对石油醚提取,经正交实验,确定了2mL的无水乙醚和石油醚(1∶1,v/v),超声波震荡萃取6min(工作频率40 kHz,超声功率100 W),提取温度20℃。在优化的提取条件下提取异养小球藻藻株270和藻株WLZ-H,每克藻粉中粗脂含量分别为0.3951g、0.4455g。经GC-MS测定:藻株270和藻株WLZ-H中含有十六碳烯酸、硬脂酸、亚油酸和亚麻酸。通过对三种酯化方法的比较,选择了酸碱酯化法为最佳酯化方法。对亚油酸的提取方法和酯化方法进行了优化,优化后藻株270、藻株WLZ-H每克干藻粉能提取亚油酸含量分别为2.91 mg、4.70 mg。
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