论文部分内容阅读
目的：观察截瘫三联针治疗SD大鼠脊髓损伤的有效性,探讨其可能的作用机制,为临床脊髓损伤的治疗提供实验依据。方法：采用改良钳夹法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将75只脊髓损伤大鼠随机分为5组,每组15只。A组：治疗组(截瘫三联针+甲基强的松龙),B组：对照组(常规针刺+甲基强的松龙),C组：基础治疗组(甲基强的松龙),D组：模型组，E组：假手术组。甲基强的松龙治疗,于脊髓损伤术后即刻行甲基强的松龙腹腔注射；电针治疗,A、B两组分别于脊髓损伤术后4h行相应腧穴电针治疗,模型组与假手术组不做任何治疗。各组大鼠分别于1、3、7天行行为学运动功能BBB评分观察大鼠神经功能变化后,取损伤段脊髓组织行伊红-苏木素(HE)染色观察脊髓组织结构变化,并通过免疫组织化学方法(IHC)观察各组大鼠急性脊髓损伤后降钙素基因相关肽(CGRP)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)阳性细胞的表达情况。结果：1.行为学结果显示：①与E组比较,A、B、C、D组大鼠1、3、7天BBB评分均明显降低(P<0.05)；②治疗1d后,A、B、C、D各组大鼠后肢BBB评分未见明显差异(P>0.05)；③治疗3d后,A、B、C各组评分均高于D组(P<0.05),A、B、C各组比较未见明显差异(P>0.05)；④治疗7d后,A、B组评分均高于C、D组(P<0.05),A、B两组比较未见明显差异(P>0.05),C组评分高于D组(P<0.05)；⑤A、B、C、D各组1d、3d、7d组内比较,BBB评分均有不同程度的恢复,差异均具有统计学意义(P<0.05)；⑥E组各个时间点比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.HE染色结果显示：各治疗组及模型组脊髓内均可见不同程度的出血灶、炎性细胞浸润,坏死、空洞形成,亦可见残存神经元胞体变圆、胞核固缩、边置、消失,且白质与灰质界限不清；与模型组相比,A、B、C各组脊髓组织病理学改变明显减轻；假手术组各个时间点神经元结构形态规则,白质致密,无明显出血、水肿、坏死、炎细胞浸润等变化。3.免疫组化结果显示：①GRP:A、B、C、D、E各组均可见阳性细胞表达,1d、3d与E组比较,脊髓损伤各组阳性细胞表达量明显低于E组(P<0.05)；治疗7d后,A、B两组阳性细胞表达与E组比较未见明显差异(P>0.05),C、D两组阳性细胞表达明显低于E组(P<0.05)；A、B两组各个时间点阳性细胞表达量明显高于C、D两组(P<0.05)；A组与B组比较和C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05)：A组1d与3d、1d与7d、3d与7d组内比较,B、C、D三组1d与7d、3d与7d比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。②Caspase-3:假手术组仅见少量的阳性细胞,脊髓损伤后各组均可见阳性细胞表达,1d.3d.7d,A.B.C.D各组阳性细胞表达明显高于E组(P<0.05),A、B、C各组阳性细胞表达明显低于D组(P<0.05)；治疗1d后,A、B、C组阳性细胞表达未见明显差别(P>0.05)；治疗3d、7d后,A、B两组阳性细胞表达低于C组(P<0.05),但A、B两组比较差异无统计学意义(P>0.05)；A、B两组1d与3d、3d与7d组内比较,C、D两组1d与3d、1d与7d、3d与7d组内比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：1.截瘫三联针在改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能方面有效；2.截瘫三联针的作用机制可能与促进神经保护因子CGRP的表达,抑制细胞凋亡因子Caspase-3的表达,从而抑制细胞凋亡,减轻继发性损害,保护神经细胞,促进其再生修复有关；3.“以运动为腧”的取穴方法可作为一种新的取穴方法应用于临床。