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中药材赤芍是毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根,是.《中国药典》(2010年版一部)收载的中药品种之一,具有清热凉血,散瘀镇痛之功效。芍药苷为其主要活性成分。药理研究表明该药有抗血栓形成作用、能显著降低重型肝炎患者血清内毒素及血清肿瘤坏死因子,改善肝脏生化指标的作用,此外尚具有镇静、镇痛、抗惊厥、抗炎及抗肿瘤等活性。赤芍在临床应用广泛,许多中成药制剂中都有赤芍成分,剂型有汤剂、片剂、颗粒剂、合剂等,目前正在研究开发的还有以芍药苷为主成分注射剂。本研究共收集了40个不同产地的赤芍样品,以芍药苷为指标成分进行了提取纯化方法研究,对不同产地样品的含量进行测定、比较,为中药赤芍注射剂的生产提供工艺参考。同时对赤芍的指纹图谱进行研究,在中药药效多是在有效成分不完全明确的前提下,依靠其所含的多种化学成分的总体作用,将赤芍作为一个“整体”进行质量优劣的分类研究,建立质量控制方法,提供中药材原料选择、购买的依据。具体研究内容如下:1.对赤芍中化学成分芍药苷提取方法进行了研究。比较水、甲醇、不同浓度的乙醇对芍药苷的提取效率,结果显示70%乙醇提取效果最好。并以70%乙醇作为提取溶剂进行提取方法的比较,对提取溶剂量、提取时间、提取次数,运用正交设计进行了优化,找到了最佳的提取条件;结果显示,用10倍量的70%乙醇超声提取3次,每次1h,提取效率最高,且简便易行。2.对赤芍提取液进行纯化方法的研究。使用HPD-300大孔吸附树脂,运用正交设计进行药液浓度、吸附速率、洗脱速率、树脂柱径高比洗脱参数的考察,实验结果表明吸附洗脱最佳工艺条件为赤芍药液浓度1.0 g/ml、树脂柱径高比1:10、上样速度4BV/h、洗脱速度5BV/h,洗脱效率可达到80%以上。3.按照《中国药典》规定用高效液相色谱法对赤芍中芍药苷进行含量测定的方法,考察芍药苷含量与其产地的关系。以MetaChem Kromasil C18 (4.6mm X 250 mm, 5μm)为色谱柱,甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(32:68)为流动相;检测波长为229nm,柱温为室温,芍药苷为标准对照,以对照品峰面积为纵坐标(Y),以浓度为横坐标(X)绘制标准曲线,得一条直线。回归方程为Y=106.22X+193.35,r=0.9993,芍药苷在20.48-307.2μg/mL范围内呈良好的线性关系,且分离度好,方法简便,重现性好。结果显示内蒙古产赤芍中芍药苷的含量最高,其次为辽宁、吉林及黑龙江产赤芍中芍药苷含量相对较高。4.对赤芍样品的指纹图谱进行研究,进行系统聚类分析,建立对赤芍进行质量判别的分类方法。采用高效液相色谱法,获得了40个赤芍药材的HPLC色谱指纹图谱,对赤芍进行了色谱指纹图谱的研究,实现了对25个化学成分色谱峰的分离,获取了反映该药材“整体”的化学数据,运用“DPS”统计分析软件将所获化学数据进行系统聚类分析研究,将赤芍样品分为优质品、一般品及劣质品3类。通过逐步判别分析,获得判别系数,形成判别函数,3类样本模型的判别函数分别为:Y1=-34.0112+17.51×X1+72.3921×X7-146.0773×X9+147.0177×X11+25.8711×X14; Y2=-3.4159-0.5246×X1+18.7094×X7+18.6650×X9+2.4383×X11-12.4320×X14; Y3=-262.6948+69.6192×X1+315.5969×X7-365.6156×X9+587.2904×X11+531.7006×X14并用已知样品对聚类方法和判别函数进行了验证实验。结果表明,聚类分析和相关函数结果一致,验证实验正确率100%。