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目的:观察莪术油注射液对体外培养的人上皮性卵巢癌SKOV3细胞周期变化及CDK2、IL-1β、和P38的表达,探讨莪术油注射液对SKOV3细胞周期调控,并从炎症细胞因子和MAPK信号传导通路方面来初步探讨莪术油注射液诱导SKOV3胀亡的作用机制。 方法:不同药物浓度作用SKOV3细胞株后,采用MTT法检测莪术油注射液对SKOV3细胞的抑制增殖作用;通过倒臵显微镜观察细胞在培养液中的形态学变化;对细胞进行HE染色后通过光学显微镜观察细胞形态学变化;通过透射电镜观察细胞的超微结构变化;运用流式细胞术来检测细胞周期的变化;通过ELISA法来测定CDK2、IL-1β、P38的表达水平。 结果:①莪术油注射液对SKOV3细胞体外生长具有明显的抑制作用,其抑制作用随浓度的增加而不断加强,呈现一定的量效关系,其中48h半数抑制浓度(IC50)为67.48μg/ml; ②选择44.5、66.7、100μg/ml浓度的莪术油作用细胞48h后倒臵显微镜观察,大体可见细胞密度明显减少,胞体变长,细胞内颗粒感增强,细胞界限模糊,细胞间隙逐渐增宽,细胞质减少,胞浆减少,细胞脱落呈悬浮状,存活细胞减少,细胞核碎裂,可见细胞碎片,随着莪术油作用浓度的增加,上述现象更加明显; ③选择44.5、66.7、100μg/ml浓度的莪术油作用细胞48h后进行HE染色普通光镜观察,主要变化为细胞肿胀,体积增大,胞浆空泡化,胞浆内出现致密颗粒,胞质空泡化,内质网肿胀;细胞核内染色质分散,凝集在核膜、核仁周围,有时聚集成团块;胞膜起泡,通透性增加,细胞膜完整性破坏、胞膜崩解,最后细胞核溶解; ④选择44.5、66.7、100μg/ml浓度的莪术油作用细胞48h后透射电镜观察,发现卵巢癌细胞胞体肿胀,细胞膜空泡化,细胞质出现虫蚀状和空泡化,粗面内质网扩张,线粒体肿胀,嵴破坏,数量减少,细胞核染色质分散,凝集在核膜、核仁周围,甚至核膜完整性破坏,结构崩解,核溶解性,细胞内容物逸出的典型胀亡细胞形态; ⑤经不同浓度莪术油注射液作用SKOV3细胞48h后,随着浓度的增加,S期细胞比例逐渐增高,G2期细胞比例逐渐减少,G1期细胞的比例变化无明显变化规律; ⑥经不同浓度莪术油注射液作用48h的SKOV3细胞,随着浓度的增加,CDK2的表达量逐渐下降; ⑦经不同浓度莪术油注射液作用48h的SKOV3细胞IL-1β的表达量均低于空白对照组; ⑧经不同浓度莪术油注射液作用48h的SKOV3细胞,P38的表达量无明显变化。 结论:①莪术油注射液对SKOV3细胞具有明显的抑制作用,且抑制作用呈量效关系,其中48h半数抑制浓度(IC50)为67.48μg/ml; ②莪术油注射液可使体外培养SKOV3细胞出现细胞胀亡; ③莪术油注射液能诱导SKOV3细胞CDK2表达量下调从而产生S期阻滞,且呈剂量依赖性; ④莪术油注射液能诱导SKOV3细胞IL-1β表达下降,从而诱导其胀亡。