食药同源资源中黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选、组方及工艺优化

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由于人体内因嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍使得血尿酸浓度含量过高,引发以高尿酸血症为基础的多种疾病。减少尿酸生成或促进尿酸排泄相关研究显得颇为重要。黄嘌呤氧化酶是催化产生尿酸的过程中起着极其重要的作用,因此,黄嘌呤氧化酶抑制剂能够有效改善高尿酸血症。在大健康产业背景下,寻找天然安全的黄嘌呤氧化酶抑制剂是研究的新趋势。我国拥有丰富的食药同源植物资源,使用安全性较高,本课题以食药同源资源为研究对象,从中筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂,并进行组方研究及提取工艺优化,以期为降尿酸保健食品的研究和开发奠定基础和提供科学依据。本研究对二十种食药兼用资源水提物进行筛选,发现菊花、金银花、荷叶三种植物水提物效果较好,随后对三种水提物进行了黄嘌呤氧化酶抑制效果的组合比例研究,发现最优组合比例,并进一步在小鼠体内进行了相关实验验证。在此基础上,以提取率为评价指标,对荷叶、金银花、菊花分别进行了响应面法提取工艺优化及抗氧化能力测定。研究结果显示,荷叶、金银花、菊花水提物对黄嘌呤氧化酶的IC50分别为19.723mg/m L、19.347mg/m L、20.280mg/m L,均显示出较好的抑制活性,并呈现剂量依赖性,高剂量效果最明显。三者水提物按照不同的组合比例进行体外实验,发现金银花、菊花、荷叶以1:1:1的比例进行组合时,对黄嘌呤氧化酶的抑制作用最好,在浓度为20mg/m L时的抑制率为57.6%。荷叶、金银花、菊花以1:1:1的比例组合进行小鼠体内降尿酸实验,表现出较好的降低血尿酸效果(浓度为20mg/m L),且对于肝脏及肾脏等器官和相应指标无不良影响,可以为食药同源资源保健品研发与利用提供相应的参考依据。在响应面方法的优化下,对三种食药兼用资源的水提物分别得到了比较好的提取工艺。荷叶水提物的提取优化工艺为提取时间90min、提取温度80℃、提取次数2次、料液比1:30。金银花水提物的提取优化工艺为提取时间90min、提取温度90℃、提取次数3次、料液比1:40。菊花水提物的提取优化工艺为提取时间90min、提取温度90℃、提取次数2次、料液比1:30。利用响应面优化的工艺方法准确度较高,为后续保健食品的开发提供提取工艺参考。在抗氧化能力研究中发现:清除羟基自由基的能力强弱为金银花>荷叶>菊花,对于DPPH自由基抑制能力强弱为菊花>荷叶>金银花,对于ABTS自由基抑制能力强弱为菊花>金银花>荷叶。
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