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肉类是人类获取蛋白质的主要来源,我国作为猪肉的最大生产国和消费国,提高猪肉品质尤为重要。养猪生产过程中,传统的三阶段(Three-phase feeding,TPF)饲喂方式是根据体重将生长期划分为三个阶段,并为每个阶段提供单一指定的日粮,但是单一日粮并不能满足动物生长过程中变化的营养需求。日阶段(Daily-phase feeding,DPF)的饲喂方式是采用两种不同的饲料,每天以不同的比例混合配制不同营养水平的日粮,可以更加顺应猪生长的营养需求。过去的研究主要致力于DPF对饲料转化效率、生产成本以及氮、磷排放的影响,在猪肉品质的研究甚少。DPF改变了每日日粮组成及营养水平,而日粮是肠道微生物区系变化和代谢产物改变的重要影响因素,因此,本研究主要对比相比于TPF的饲喂方式,DPF的饲喂方式对生长育肥猪肉品质的影响,并进一步探究在这两种饲喂方式下的肠道微生物区系以及肌肉代谢组学分析下代谢产物和代谢通路的差异变化。试验选取80日龄体重相近、健康状况良好的二元杂交(长白×大白)生长育肥猪240头,随机分为2组,每组8个重复,每个重复15头,分别按照三阶段和日阶段的方式饲喂至出栏后屠宰。主要检测结果如下:试验一:日阶段饲喂方式对猪肉品质,猪肉抗氧化能力及肌纤维类型的影响(1)与TPF组相比,DPF组的基本营养物质水分、粗蛋白和肌内脂肪的含量没有显著差异(P>0.05),猪肉的感官品质指标(肉色、p H45min、p H24h、滴水损失和剪切力)没有显著差异(P>0.05)。(2)与TPF组相比,DPF组肌肉的过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性没有显著差异(P>0.05),但是有增加的趋势;丙二醛(MDA)的含量降低,但没有显著差异(P>0.05);总抗氧化能力(T-AOC)的含量显著增加(P<0.05)。(3)对TPF和DPF两个组进行血清学检测,发现与TPF组相比,DPF组血清中甘油三酯(TG)的含量显著升高(P<0.05),而血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(NEFA)的含量没有显著差异(P>0.05)。(4)对TPF和DPF两组的肌肉HE染色进行形态学分析,DPF组的肌纤维横截面积要显著低于TPF组(P<0.05)。(5)检测肌纤维分型相关基因表达量发现:与TPF组相比,DPF组的My HCⅠ的m RNA相对表达量显著升高(P<0.05);My HCⅡa、My HCⅡb和My HCⅡx的m RNA相对表达量没有显著差异(P>0.05)。(6)检测与线粒体生成相关基因表达量发现:与TPF组相比,DPF组的PGC1α、NRF1和CPT1b的m RNA相对表达量都显著升高(P<0.05)试验二:日阶段饲喂方式对生长育肥猪肠道微生物和肌肉代谢组的影响(1)通过对TPF和DPF两个处理组生长育肥猪粪便微生物16S r DNA高通量测序分析,厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和螺旋体门(Spirochaetes)为共同的3种优势菌门。其中,DPF和TPF两组间显著差异的微生物为变形菌门(Proteobacteria)(P<0.05);与TPF组相比,瘤胃球菌(Ruminococcus_gnavus)、马链球菌(Streptococcus_equi)显著降低(P<0.05),DPF组乳酸菌(Lactobacillus_agilis)相对升高;(2)通过对肌肉代谢组学分析,与TPF组相比,DPF处理组通过上调AMP促进了AMPK-FOXO、PI3K-Akt-FOXO信号通路,从而促进机体的能量代谢及肌肉的抗氧化能力。由上述结果可知,相对于传统三阶段的饲喂方式,日阶段饲喂方式能够提高猪肉品质。因为肌肉抗氧化能力和Ⅰ型肌纤维的含量显著增加。日阶段的饲喂方式能够改变肠道微生物区系的组成以及差异代谢产物和代谢通路的变化,Lactobacillus_agilis可以作为候选差异微生物,AMP促进AMPK-FOXO、PI3K-Akt-FOXO作为差异代谢通路,共同用于日阶段饲喂方式改善猪肉品质的机理研究。