血红栓菌的色素提取及其特性研究

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本试验以采摘自丰林国家自然保护区的大型真菌——血红栓菌为试验材料,首先对其子实体进行形态学观察并从子实体中分离获得血红栓菌菌种,将获得的菌种进行平板培养和液体摇瓶培养,观察平板上菌落形态以及菌丝体形态,同时对其进行18s rDNA分子鉴定,综合分析上述结果,鉴定采集获得的菌株确实为血红栓菌。血红栓菌在液体发酵培养过程中可以产生色素,研究发现,该色素为水溶性色素,极性较大,不溶于乙酸乙酯、丙酮、氯仿、正己烷等有机溶剂,在少量的水溶液中加入大量无水乙醇可以析出。采用大孔树脂静态吸附和动态洗脱相结合的方法分离提取血红栓菌液体发酵培养中产生的色素,使得色素色价由原来的2.59提升到19.06,提高了6.36倍。发酵液中的大部分多糖、蛋白质等杂质已被去除,说明该方法具有良好的色素纯化效果。对血红栓菌色素在不同pH下的稳定性的研究表明,该色素在偏酸性或偏碱性条件下性质较为稳定,而在强碱性条件下,吸光度变化较大,稳定性较差;对血红栓菌色素在金属离子环境中稳定性的研究表明,金属离子K+,Na+和Al3+对血红栓菌色素吸光度影响较小,Gu2+和Zn2+对血红栓菌色素具有一定的增色作用;温度对血红栓菌色素的影响表明长时间的高温处理会使血红栓菌色素部分分解,从而导致吸光度显著降低;氧化还原剂对血红栓菌色素的影响表明,该色素对还原剂Na2SO3具有良好的稳定性,对氧化剂H202的稳定性相对较差。通过单因素试验和正交试验得出血红栓菌产色素的最优培养条件为:麦芽糖26g/L,蛋白胨5g/L,pH=7.5,培养温度30℃,转速为120r/min。该培养条件下色素产量较初始培养条件下提高了75.07%。真菌色素凭借其无毒且兼具有药理作用具有十分广阔的开发前景,但其稳定性通常较差,色素稳定性的好坏直接影响到着色物质的色泽和品质,因而本研究中对血红栓菌色素稳定的研究对该色素今后的应用范围提供部分理论依据。天然色素要投入到实际生产应用中,除了要保证其色价和稳定性,产量也十分重要。本研究中对血红栓菌产色素培养条件的优化结果,为下一步开发和利用血红栓菌色素以及今后血红拴菌色素的大规模生产和应用提供了一定的理论基础。
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