c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族中的一员,参与调控细胞存活、增殖、分化、凋亡等多种细胞功能。哺乳动物细胞中JNK有JNK1、JNK2、JNK3三型,其中JNK3仅限于在脑、心脏和睾丸中表达,而不表达于造血干细胞。JNK1和JNK2在组织中广泛表达,可被细胞外的细胞因子、应激刺激等多种因素激活。JNK信号通路是一个由上游激酶、下游底物以及支架蛋白等各组分构成的复杂调控网络,在将细胞外刺激信号转导至细胞核内转录因子的过程中起重要作用,同时又存在着与细胞内其它信号通路的相互联系,对胞外的各种信号做出特异、有效的应答,从而对细胞的多个生命过程进行调控。JNK对细胞的调控作用在不同的细胞类型中表现不同,且JNK1和JNK2对细胞的调控具有各自不同的作用。在由抗原刺激引起的活化和表达之前,JNK在T细胞和B细胞中的表达水平非常低。JNK信号通路可通过免疫细胞表面的抗原受体以及多种细胞因子受体等识别外界刺激而活化,进而参与调控免疫细胞的多种生命活动和免疫应答。有关JNK信号通路对辅助性T细胞(CD4+T细胞)增殖、分化等过程调控作用的研究比较广泛,也较为清楚。而有关JNK信号通路对杀伤性T细胞(CD8+T细胞)调控作用的研究还比较有限,特别是JNK1、JNK2特异性地调控CTL的不同功能的具体分子机制还不清楚。杀伤性T细胞(cytolytic T lymphocyte, CTL)是机体抗病毒感染免疫过程中至关重要的效应细胞。病毒感染后,初始CD8+T细胞识别抗原而活化,经历迅速、大量的克隆增殖后,分化为具有MHC I类分子限制性和抗原特异性的效应CTL。CTL主要通过两种机制发挥抗病毒效应：一方面CTL通过穿孔素-颗粒酶介导的细胞毒作用对病毒感染细胞直接进行杀伤；另一方面CTL分泌效应细胞因子,如IFN-y,对病毒的复制和扩散进行控制。鼠痘病毒(ectromelia virus, ECTV)与人类天花病毒(variola virus, VARV)同属于痘病毒科正痘病毒属,与天花病毒具有高度的同源性。ECTV感染具有种属特异性,感染小鼠后可引发与人类感染天花病毒后极为相似的病理过程及宿主抗病毒反应,是研究病毒致病机理及宿主抗病毒反应的良好模型。ECTV感染后,小鼠的预后及转归与机体的免疫应答密切相关。小鼠的康复需要巨噬细胞、NK细胞、NKT细胞等固有免疫细胞以及CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞等适应性免疫细胞和干扰素(IFNs)等细胞因子的联合作用,其中CTL介导的细胞免疫应答是控制和清除ECTV最为重要的因素。本论文采用模拟ECTV自然感染JNK敲除(JNK1-/-、JNK2-/-)小鼠模型,探索JNK信号通路在CTL抗病毒感染免疫应答中的调节作用。结果显示,JNK1、JNK2缺失后,小鼠对ECTV的抵抗及清除能力明显下降。JNK1缺失后CD8+T细胞增殖能力下降,而JNK2缺失后CD8+T细胞增殖能力增强,但JINK1、JNK2缺失均未对CD8+T细胞活化后诱导的凋亡(AICD)产生明显影响。说明JNK1、JNK2缺失导致的细胞增殖差异不是影响小鼠病毒清除能力下降的直接原因。进一步的实验发现,JINK1、JNK2缺失后CD8+T细胞的活化水平下降,针对ECTV免疫主导表位B8R的病毒特异性CTL的数量与野生型小鼠相比显著下降；JNK1-/-和JNK2-/-小鼠CTL产生颗粒酶B及IFN-γ的能力显著下降；而且JNK1、JNK2缺失后,CTL特异性杀伤能力(细胞毒作用)表现为延迟并降低。本论文的实验结果说明,JNK缺失导致CTL的活化和效应功能受损是小鼠抵抗及清除病毒能力下降的主要原因,提示JNK通过调控CTL应答在机体抗病毒免疫过程中发挥重要的调节作用,并且不同型别的JNK对CTL的调控作用不同。本论文的研究结果,对于深入了解免疫应答反应,尤其是CTL应答的调控机制具有重要价值,同时可为感染性疾病和肿瘤的临床免疫治疗提供理论参考和潜在工具。