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近年来,植物多糖的研究日益受到关注,铁皮石斛作为我国一种传统名贵的中草药,探索其主要药效成分铁皮石斛多糖潜在的药理活性具有重要意义。本文首要研究了铁皮石斛多糖对小鼠胚胎干细胞的作用药效。自21世纪以来,恶性肿瘤一直严重威胁着人类的生命健康,开发低毒高效的抗癌药物具有非常重要的研究意义。在此背景下,本文对铁皮石斛多糖的抗癌及免疫活性进行了研究探索。主要内容分为以下4个部分：1.通过传统的水提醇沉的方法对铁皮石斛多糖进行初步提取,经Sevage脱蛋白。通过苯酚-硫酸法对所提多糖进行含量测定。测得本次实验中铁皮石斛多糖的提取率为10.01%,所提铁皮石多糖中多糖含量为87.35%。2.体外培养小鼠胚胎干细胞,通过克隆形成率分析,MTT法检验及生长曲线测定研究所提铁皮石斛多糖对其增殖的作用,并通过实时定量PCR的方法,测定小鼠胚胎干细胞相关干性基因Nanog、Oct4、 Sox2、Klf4、Lin28、Rexl和Aire的表达,检测铁皮石斛多糖对其多潜能性维持的作用。结果证实铁皮石斛多糖可以提高小鼠胚胎干细胞的克隆形成率,促进其增殖,同时又不影响其多潜能性的维持和表达。3.体外悬浮培养小鼠胚胎干细胞形成拟胚体,模拟早期胚胎向三胚层体系分化过程,通过实时定量PCR的方法,检测外胚层标志性基因Nestin和Fgf5、中胚层标志性基因Flk1和SM22α和原始内胚层标志性基因AFP和Sox17的表达,研究铁皮石斛多糖对小鼠胚胎干细胞形成的拟胚体生长分化的影响。实验结果初步说明低浓度(25～200μg.ml-1)的铁皮石斛多糖不利于EB的生长分化,高浓度(200～400μg.ml-1)的铁皮石斛多糖对EB的从ICM向三胚层体系的分化过程无显著影响。4.体外培养人肝癌细胞HepG2.人肺癌细胞A549、小鼠畸胎瘤干细胞F9及人畸胎瘤干细胞NCCIT,对这些细胞进行形态分析及增殖速度测定发现铁皮石斛多糖可以抑制HepG2、A549、NCCIT及F9的生长,具有一定的抗癌活性；体外分离培养小鼠脾脏细胞及腹腔巨噬细胞,研究铁皮石斛多糖促免疫细胞增殖的作用,实验结果说明铁皮石斛多糖可以促进小鼠脾脏细胞的增殖,具有一定免疫活性(主要是脾细胞相关的体液免疫)。