鬼针草为菊科（Compositae）管状花亚科鬼针草属（Bipinnata L）植物,为一年生草本,其药材资源非常丰富,药用历史悠久。鬼针草类药材全草均可用药,味苦性平而无毒,具有清热解毒,散瘀消肿等功效,主治疟疾、腹泻、痢疾、肝炎、急性肾炎、胃痛、噎膈、肠痈、咽喉肿痛、跌打损伤、蛇虫咬伤等。鬼针草所含化学成分种类较多,其活性成分以聚乙炔类和黄酮类成分为主。多年的中医临床实践发现其对肝炎、肝纤维化有很好的治疗作用。文献检索显示鬼针草的醇提物有抗炎作用、清除自由基和免疫调节等作用。因此我们提取了其有效部位总黄酮（total flavones of Bidensbipinnata L.,TFB）,本室前期的研究初步表明灌胃（igtragastric administration,ig）给予TFB对CCl₄诱导的急性肝损伤有一定的保护作用。为了进一步观察TFB对慢性肝损伤的治疗作用,本文在查阅大量文献和前期研究基础上,采用CCl₄诱导的大鼠肝纤维化模型和体外培养HSC方法,分别从细胞和分子水平分析了TFB对实验性肝纤维化的治疗作用和机理。1.TFB对实验性肝纤维化的治疗作用TFB160,80 mg/kg ig 10周能显著抑制肝纤维化大鼠肝、脾指数增加;降低血清中升高的ALT、AGT、HA、PCⅢ、CⅣ和肝组织中Hyp含量;病理组织学和电镜检查结果显示TFB160,80mg/kg组肝脏组织结构明显改善,肝纤维化增生程度减轻。提示TFB对CCl₄所致大鼠肝纤维化有明显的治疗。初步探讨其作用机制,发现TFB160,80,40mg/kg可以显著抑制肝纤维化大鼠肝组织中MDA的生成;促进肝组织中GSH-Px的活性;降低肝纤维化大鼠血清中TNF-α、IL-1β的含量;抑制肝组织中NF-κβ、TGF-β1蛋白和TGF-β1mRNA表达。同时TFB160,80mg/kg显著减少活化的HSC数目,可检测到其凋亡,提示TFB治疗实验性肝纤维化的作用可能与其抑制细胞膜脂质过氧化、某些细胞因子的生成和诱导体内活化的HSC凋亡有关。2.TFB对HSC TGF-β1/Smads通路的作用采用CollagenaseⅣ原位肝灌注法分离HSC,MTT法观察TFB对HSC增殖的影响;RT-PCR法观察TFB对TGF-β1刺激HSC活化过程中smads2,smads7 mRNA和α₂（I）前胶原mRNA表达的影响;Westernblot法观察TFB对其smads2蛋白表达的影响。结果表明TFB 0.1～0.0125mg/ml能显著抑制HSC的增殖和TGF-β1刺激的HSC的增殖,抑制TGF-β1刺激的HSC smads2 mRNA和α₂（I）前胶原mRNA高表达,且明显上调smads7 mRNA表达,并呈一定的量效关系;同时TFB亦显著抑制TGF-β1刺激的smads2蛋白表达。3.TFB对活化的HSC凋亡的作用采用透射电镜和流式细胞仪分别观察TFB对活化HSC凋亡形态和凋亡率的影响;采用免疫细胞化学SABC法和RT-PCR法观察TFB对活化HSC P⁵³,bax和Fas/FasLmRNA表达的影响。结果显示TFB体外作用HSC 48h后,可见部分HSC出现内质网扩张,染色质浓缩并凝结成块,核内异染色质沿核膜内侧排列等凋亡样形态改变;活化的HSC凋亡率为16.05%±0.93%,与空白对照组（1.85%±0.31%）相比,凋亡率显著增加（P＜0.01）。同时TFB促进活化的HSC中P⁵³,bax蛋白和Fas/FasLmRNA的表达而诱导HSC凋亡。小结:TFB对CCl₄诱导的大鼠肝纤维化具有明显的治疗作用;可显著降低肝纤维化大鼠血清中转氨酶,HA、PCⅢ、CⅣ和肝组织中Hyp含量,减轻大鼠肝纤维化程度,抑制胶原的生成;且TFB体外给药可以显著抑制HSC的增殖、阻断TGF-β1/Smads通路,促进P⁵³,bax蛋白,Fas/FasL mRNA的表达而诱导HSC凋亡。探讨其作用机制,发现其治疗肝纤维化作用可能与其抗细胞膜脂质过氧化损伤,抑制体内某些细胞因子的生成,抑制HSC的活化、增殖,促进活化的HSC凋亡有关。