【摘 要】
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石斛属（Dendrobium Sw.）为兰科（Orchidaceae）多年生珍稀濒危附生植物,具有较高药用和观赏价值。选取高生物碱含量的三种药用石斛:束花石斛（D.chrysanthum）、紫瓣石斛（D.parishii）、报春石斛（D.primulinum）,取其茎、叶和花为材料,研究了三种石斛的生物碱成分和相对含量。同时,比较了三种石斛生物碱分布的异同点。以报春石斛为例,探索石斛抗癌活性的物质
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石斛属（Dendrobium Sw.）为兰科（Orchidaceae）多年生珍稀濒危附生植物,具有较高药用和观赏价值。选取高生物碱含量的三种药用石斛:束花石斛（D.chrysanthum）、紫瓣石斛（D.parishii）、报春石斛（D.primulinum）,取其茎、叶和花为材料,研究了三种石斛的生物碱成分和相对含量。同时,比较了三种石斛生物碱分布的异同点。以报春石斛为例,探索石斛抗癌活性的物质基础。以人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和人肺癌细胞株A547为研究对象,采用不同极性溶剂从报春石斛茎中提取有效成分,分析报春石斛的抗癌活性。本研究结论如下:（1）采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,从三种石斛中分析鉴定出共13个生物碱活性成分:古豆碱（Ⅰ）、报春石斛碱（Ⅱ）、石斛宁（Ⅲ）、4-羟基石斛星碱（Ⅳ）、石斛酮碱（Ⅴ）、N-p-阿魏酸酪酰胺（Ⅵ）、棒节碱D（Ⅶ）、N-p-桂皮酸酰酪胺（Ⅷ）、顺式石斛黄碱（Ⅸ）、石斛碱（Ⅹ）、兜唇石斛碱（Ⅺ）、玫瑰石斛胺（Ⅻ）和顺式束花碱（ⅩⅢ）。包含4个倍半萜类生物碱、5个四氢吡咯类生物碱、2个八氢中氮茚类生物碱、2个酰胺类生物碱。4个生物碱首次在报春石斛中发现,10个生物碱首次在紫瓣石斛中发现,5个生物碱首次在束花石斛中发现。（2）分析鉴定报春石斛茎、叶中的生物碱,从中分离鉴定出6个生物碱成分:古豆碱（Ⅰ）、报春石斛碱（Ⅱ）、4-羟基石斛星碱（Ⅳ）、石斛酮碱（Ⅴ）、N-p-桂皮酸酰酪胺（Ⅷ）和（Ⅹ）。首次在报春石斛中发现3个倍半萜类生物碱（4-羟基石斛星碱、石斛酮碱和石斛碱）,以及一个酰胺类生物碱（N-p-桂皮酸酰酪胺）。（3）分析鉴定紫瓣石斛茎、叶中的生物碱,从中分离鉴定出10个生物碱成分:古豆碱（Ⅰ）、报春石斛碱（Ⅱ）、4-羟基石斛星碱（Ⅳ）、石斛酮碱（Ⅴ）、N-p-阿魏酸酪酰胺（Ⅵ）、棒节碱D（Ⅶ）、N-p-桂皮酸酰酪胺（Ⅷ）、顺式石斛黄碱（Ⅸ）、石斛碱（Ⅹ）和玫瑰石斛胺（Ⅻ）。（4）分析鉴定束花石斛茎、叶、花中的生物碱,从中分离鉴定出8个生物碱成分:古豆碱（Ⅰ）、报春石斛碱（Ⅱ）、石斛宁（Ⅲ）、石斛酮碱（Ⅴ）、顺式石斛黄碱（Ⅸ）、石斛碱（Ⅹ）、兜唇石斛碱（Ⅺ）和顺式束花碱（ⅩⅢ）。分别归属于八氢中氮茚类生物碱（报春石斛碱）、倍半萜类生物碱（石斛酮碱、石斛碱）和四氢吡咯类生物碱（石斛宁、兜唇石斛碱）。结果表明,束花石斛中各部位生物碱含量由高到低依次是花、叶、茎,差异显著。（5）比较分析三种石斛的生物碱成分,三种石斛共有的成分有4个:古豆碱（Ⅰ）、报春石斛碱（Ⅱ）、石斛酮碱（V）和石斛碱（Ⅹ）。紫瓣石斛和束花石斛所皆含顺式石斛黄碱,4-羟基石斛星碱,报春石斛和紫瓣石斛皆含N-p-阿魏酸酪酰胺。基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,根据峰面积计算生物碱相对含量,比较三种石斛中生物碱相对含量,由高到低依次是束花石斛、报春石斛和紫瓣石斛。束花石斛中以四氢吡咯类生物碱为主,顺式石斛黄碱含量最高,达3137.73μg·g-1。报春石斛中以八氢中氮茚类生物碱为主,报春石斛碱含量最高,达495.278μg·g-1。紫瓣石斛中以倍半萜类生物碱为主,石斛碱含量最高,达90.095μg·g-1。（6）通过CCK-8测定细胞活性,以紫杉醇为阳性对照,结果表明报春石斛茎四个部位对人肺癌细胞和人乳腺癌细胞的增殖速率有抑制作用,其抑制能力随着作用时间的延长或给药浓度的升高而增强,且呈现出低剂量下药效快的特点。乙酸乙酯部位在2.00mg/ml作用下,肺癌细胞72 h最高抑制率达91%。石油醚部位在2.00 mg/ml作用下,乳腺癌细胞72 h达到最高抑制率为94%。
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