鳕鱼皮胶原蛋白肽的促钙吸收作用研究

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我国的海岸线狭长,渔业资源非常丰富。海洋渔业是近年来我国发展最快的产业之一,水产品加工以及资源的高值化利用也就成为海洋渔业的重要问题。水产品加工产生大量的下脚料废弃物,少量用来生产鱼粉和鱼饲料,利用率较低,不仅造成了资源极大的浪费,还会对环境造成污染。本课题以鳕鱼皮为原料,热水抽提法提取明胶,酶解得到胶原多肽,超滤分离制得梯级胶原多肽;通过大鼠促钙吸收试验,探讨胶原多肽的促钙吸收作用;通过多肽钙溶液结合情况及模拟消化研究,初步探讨胶原多肽的促钙吸收作用机理。本论文获得的主要研究成果如下:1、鳕鱼皮的主要成分为水分,蛋白质含量占到干物质总量的95.40%,胶原蛋白更是占到总蛋白含量的73.26%;热水抽提法,70℃条件下抽提6h,明胶提取得率为15.12%;用碱性蛋白酶和胰酶组成的复合酶在酶与底物比为1:200,50℃,pH8.0-8.2条件下分别酶解15min、120min和180min,超滤分离,旋蒸浓缩,冻干,得到Mr<2500Da、2500<Mr<6000Da、Mr>6000Da的梯级胶原多肽粉;基本指标测定结果显示,胶原多肽的纯度可以达到85%以上,各梯级多肽粉的平均分子量都在其所属的分子量肽段范围之内。2、以大鼠为实验对象,自配低钙饲料造缺钙模型,梯级胶原多肽粉在体外未与无机钙源进行特定结合,直接灌胃,进行正常生长试验和钙代谢试验,探讨梯级胶原多肽的促钙吸收作用。测定结果显示:受试多肽能促进大鼠的生长;高分子量多肽能显著提高大鼠的钙吸收率,中低分子量多肽能极显著提高大鼠的钙吸收率;高分子量多肽能提高大鼠的钙储留率,中分子量多肽能显著提高大鼠的钙储留率,低分子量多肽能极显著提高大鼠的钙储留率;受试多肽可以提高大鼠的股骨指数,促进骨骼的生长,提高大鼠的骨钙含量,而且分子量越小,其作用效果越是明显;受试多肽可以提高大鼠血清中的钙磷含量和碱性磷酸酶活性,促进大鼠的生长发育;综上所述,胶原多肽对大鼠具有很好的促钙吸收作用。3、以动物实验中灌胃的多肽与无机钙源的比例配成多肽钙溶液,通过对溶液中肽钙结合物的纯化及初步鉴定,判定多肽与钙形成可溶性肽钙络合物;通过溶液中肽钙结合率的变化情况,发现多肽钙结合物的低温稳定性良好;高温条件下,多肽会变性,不利于多肽与钙的结合,肽钙结合率较低;pH为2.0或9.0的微酸或微碱条件下,H~+或OH~-会干扰多肽与钙的结合,pH为7.4的中性条件下,钙离子与氨基和羧基的配位能力最强;共存成分乳糖有利于多肽与钙的结合,而纤维素不利于多肽与钙的结合;通过模拟消化试验溶液中肽钙结合率的变化情况,可以得出:多肽与钙结合为可溶性络合物,可以避免钙离子受消化道内其他成分的影响形成不溶性沉淀,同时多肽被消化酶水解为小肽后又会与钙离子结合,保证钙离子顺利到达钙吸收位点,促进小肠对钙的吸收,这也正好解释了动物实验中胶原多肽对大鼠的促钙吸收作用,对胶原多肽在肠道中的促钙吸收作用机理进行了初步的探讨。
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