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原花青素是一种具有强抗氧化活性的多酚混合物,广泛地存在于各种食品资源中,受到学者的广泛关注。原花青素B2作为低聚花青素的前体,具有强大的抗氧化活性,但其直接生物利用率较低,原花青素及其代谢物对肠道微生物存在明显影响。目前原花青素的抗衰老作用机制较为复杂,尚未完全清楚。本研究通过7w皮下注射D-半乳糖,建立D-半乳糖衰老模型小鼠,利用LC-Q/TOF-M和Illumina高通量测序技术,探究原花青素B2对衰老小鼠血浆代谢物和肠道菌群的影响作用,较全面阐释其抗衰老的作用途径,从而更深入地认识原花青素干预衰老的机理。(1)通过建立D-半乳糖衰老模型,探究原花青素B2对小鼠抗衰老作用的影响。结果表明原花青素B2可以提高衰老小鼠肝、脑、结肠、十二指肠的T-AOC、SOD、GSH-Px活力(P<0.05),降低MDA含量;同时,可以提高机体对膳食中钙的利用率,增加骨钙含量和所能承受的最大载荷。旷场实验表明,原花青素B2能显著提高衰老小鼠进入中心区域的次数、时间,增加衰老小鼠的总路程(P<0.05)。Morris水迷宫实验中,原花青素B2能够显著缩短衰老小鼠找到逃生平台的时间,提高进入逃生平台的次数,停留在逃生平台所在象限的时间及路程(P<0.05)。这表明原花青素B2可以提高衰老小鼠的学习记忆能力,提高组织的抗氧化能力,具有较显著地干预衰老的作用。(2)通过LC-Q/TOF-MS技术分析小鼠血浆的代谢物,筛选出原花青素B2抗衰老作用相关差异性代谢物。PCA图表明三组样本可以完全区分,PB2组与对照组相距更为接近。衰老组与PB2组筛选出24种代谢物,其中代谢物含量升高的:LysoPE、PC、油酸、肉毒碱、牛磺胆酸等。含量降低的代谢物为丙酮酸、D(-)-β-羟丁酸、泛酸、肌酸、马尿酸、牛磺酸去氧胆酸、胆汁酸等。这些潜在的生物标志物涉及了磷脂代谢、不饱和脂肪酸代谢、TCA、糖酵解、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、胆汁酸合成等多个途径。由此推测原花青素B2的抗衰老作用与脂类代谢、胆汁酸代谢、能量代谢等途径密切相关。由于芳香族化合物经过肠道微生物代谢成苯甲酸,随后肝肾结合苯甲酸与甘氨酸,形成马尿酸。肝脏中胆汁酸分泌异常会引起肠道生境一系列的改变,直接导致肠道菌群结构的变化,这些相关代谢物的改变暗示了原花青素B2对肠道菌群的影响。(3)通过Ⅰ11umina技术分析小鼠粪便肠道菌群,分析肠道菌群生物多样性。Alpha多样性分析中,除了Shannon值PB2组低于衰老组(P<0.05),其他Ace等多样性指数未出现显著差异。对比三组的Bacteroidetes/Firmicutes(B/F)值发现,原花青素B2可以提高B/F值,使其值更接近对照组(P<0.05)。PCoA图表明三组之间可以显著区分,PB2组与对照组相距更近。原花青素B2能提高Bacteroidetes、Roseburia、Lachnospiraceae等菌群相对丰度,降低Bifidobacterium、Blantia、Ruminiclostridum菌群的相对丰度,显著提高体内乙酸、丙酸和丁酸的含量(P<0.05),表明原花青素B2可调节肠道菌群的结构组成,具有抑制衰老导致的肠道菌群紊乱的作用。原花青素B2具有极强的抗氧化活性,能显著干预衰老小鼠体内氧化应激;可能通过调节糖酵解、不饱和脂肪酸合成、甘油磷脂代谢等多个代谢途径,发挥其抗衰老作用,且其干预抗衰老的作用可能与调节肠道菌群结构的途径有关。