黄花蒿青蒿酸资源及其制备工艺研究

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青蒿酸具有重要药用价值,是青蒿素、青蒿素B合成重要前体,具有重要的研究意义。本论文以武陵山地区不同生长期的黄花蒿植物为研究材料,分析了武陵山地区分布的黄花蒿植物不同生长期青蒿酸含量消长变化规律,优化了青蒿酸制备工艺,采用青蒿酸制备工艺制备青蒿酸产品,对青蒿酸的生物稳定性进行了分析,以期为武陵山地区青蒿酸资源的开发与利用提供实验和理论参考。本论文研究工作包括以下几部分:1.黄花蒿不同生长期青蒿酸含量分析对武陵山地区周边地区不同生长期黄花蒿进行了采样,采用HPLC法和TLC法分析了不同生长期黄花蒿青蒿酸含量。结果表明:(1)青蒿酸在植物中含量与其生长季节密切相关,青蒿酸6月平均含量高均高于其他月份,4月~5月表现最低(含量0.13mg/g~0.21mg/g),然后含量逐渐增高,6月~7月达到最高(含量0.27mg/g~0.23mg/g),8月~9月含量逐渐降低(含量0.22mg/g~0.15mg/g)。4月~5月为植物的幼嫩生长期,6月~7月为花蕾前期,8月~9月为植物的花蕾期和开花期,花蕾前期青蒿酸含量最高,花蕾期和开花期含量次之,幼嫩生长期含量最低。因此武陵山区黄花蒿青蒿酸资源最佳的开发利用季节为花蕾前期。青蒿酸含量还与海拔高度有一定的关系,低海拔地区青蒿酸含量高于海拔地区。2.黄花蒿青蒿酸制备工艺优化以武陵山区黄花蒿植物为青蒿酸制备材料,对青蒿酸的提取、粗分离、精分离以及结晶等工艺操作单元进行了优化。结果表明:(1)6种溶剂的青蒿酸提取率结果发现甲醇的提取率最高,约0.12%(w/w);溶剂提取次数和温度对青蒿酸提取率实验表明溶剂提取3次可将青蒿酸提取完全,室温条件下青蒿酸提取效果最好。(2)有机溶剂-碱-酸-有机溶剂粗分离具有较高的青蒿酸得率和较好的除杂效果,青蒿酸得率为81.0%(w/w),总除杂率为85.0%(w/w)。(3)不同流动相对青蒿酸的洗脱效果以及吸附剂用量对青蒿酸的分离实验室结果显示,以石油醚:乙酸乙酯=90:10(v/v)作为流动相,青蒿酸的收获量最大;吸附剂硅胶:样品=15:1(w/w)时,青蒿酸的分离效果最好。8种溶剂的晶粒结果表明石油醚析出晶体较为稳定、色泽透明。不同温度条件下,青蒿酸结晶体效果显示,-70℃、-20℃条件下结晶的晶粒色泽和形状均比较好,优于4℃条件。3.黄花蒿青蒿酸制备及其生物稳定性研究以优化的工艺条件对青蒿酸进行了制备,采用HPLC法对青蒿酸制备工艺的各操作单元及青蒿酸生物稳定性进行了分析。结果显示,通过青蒿酸制备工艺,青蒿酸产率约为60.0%(w/w)。制备的青蒿酸纯度为96%,紫外最大吸收波长为220nm,熔点为130℃~132℃,质谱为M+234。生物稳定性分析表明,青蒿酸在自然光照条件下及4℃~60℃条件下,保存30d青蒿酸具有较好的生物稳定性,在植物体内外保存一年,青蒿酸具有很好的生物稳定性。紫外光对青蒿酸具有极强的破坏作用,紫外照射6h后青蒿酸基本检测不出。青蒿制备工艺及良好的生物稳定性为青蒿酸开发利用提供了实验和理论参考。
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