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本文以中华米虾(Caridina denticulata sinensis)和日本沼虾(Macrobrachium nipponense)为材料,研究了饲料中添加硒和锰对虾体内超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)等抗氧化酶活性的影响。
首先,研究了饲料中添加量为0、 0.15、 0.30、 0.45、 0.60和 0.75 μg/g的硒,对中华米虾抗氧化酶活性的影响。结果表明,硒对中华米虾体内抗氧化酶激活作用显著,表现出明显的剂量效应,并且SOD表现出显著的时间效应。饲料中添加硒浓度为0.45μg/g时,虾体内3种抗氧化酶的活性均为最高。
接着,以中华米虾为实验材料,中华米虾实验组(饲料中添加硒浓度为0.45μg/g)和对照组(饲料中不添加硒)分别养殖30 d后,研究了亚硝酸钠胁迫下硒对中华米虾抗氧化酶系统的影响。结果表明,亚硝酸钠对中华米虾的24 h、 48 h、 72 h和96 h的半致死浓度分别为88.1、 71.2、 50.1和31.6 mg/L。中华米虾在低于96 h的半致死浓度31.6 mg/L的不同浓度亚硝酸钠胁迫下,所测定的超氧阴离子(O2.-)、SOD、GPX活力等各项生理指标均受到明显影响。O2.-随着亚硝酸钠浓度的升高而升高,而SOD、GPX活力随着亚硝酸钠浓度的升高而降低。实验组米虾SOD、GPX活力均高于对照组。可见,饲料中添加适量的硒增强了虾体的免疫能力,有利于对亚硝酸钠胁迫的抵抗性。
然后,针对目前危害虾类养殖的水污染中比较严重的多聚磷酸盐污染,探讨多聚磷酸钠对中华米虾的毒性影响。研究了中华米虾实验组(饲料中添加硒浓度为0.45μg/g)和对照组(饲料中不添加硒)分别养殖30 d后,多聚磷酸钠胁迫对实验组和对照组中华米虾抗氧化酶系统的影响。实验得出,多聚磷酸钠对中华米虾24 h、48 h、72 h和96 h半致死浓度分别为1.24、1.20、1.17和1.16 g/L。中华米虾在96 h半致死浓度1.16 g/L以下不同浓度多聚磷酸钠胁迫下,O2.-随着多聚磷酸钠浓度的升高而升高,而SOD、GPX活力随着多聚磷酸钠浓度的升高而降低。实验组米虾SOD、GPX活力均高于对照组。与亚硝酸钠胁迫实验的结果相似,印证了饲料中添加适量的硒有利于对污染物胁迫的抵抗性。
其次,研究了饲料中添加不同剂量的锰离子(0、50、100、150、200和250μg/g)对中华米虾体内SOD、GPX、CAT活力的影响。结果表明饲料中添加锰离子对中华米虾体内SOD,GPX和CAT的激活作用显著,并表现出明显的剂量效应。饲料中微量元素锰缺乏或过量可使虾体内这几种酶活性受到明显的抑制。饲料中添加锰离子,投喂中华米虾,经30 d后,锰离子添加量为150 μg/g左右的实验组,其虾体SOD,GPX和CAT活性最高,生长最快。而锰元素缺乏(﹤50 μg/g)或过量(﹥250 μg/g)可使几种酶的活力受到明显抑制。由此得出,中华米虾体内SOD,GPX和CAT活性最高时,锰离子的最佳剂量为150 μg/g。
为了验证对不同虾种的影响,本研究同时以日本沼虾为实验材料,初步研究了饲料中添加不同剂量(0、50、100、150、200和250μg/g)的锰对虾体抗氧化酶系统的影响,以及在低氧胁迫下,锰对抗氧化酶的激活效果。结果表明,在投喂不同锰添加量的饲料30 d后,锰对日本沼虾体内SOD、CAT和GPX的激活作用显著,而且表现出明显的剂量效应。饲料中锰的缺乏或过量都使它们的活性受到影响。日本沼虾体内SOD,GPX和CAT活性最高时,锰离子的最佳剂量大约为150 μg/g,这与以中华米虾为材料的实验结果一致。在低氧(4 h不充气)胁迫下,饲料中添加适量的锰(添加量约为150 μg/g),可以提高虾体内SOD,GPX和CAT活性,在一定程度上提高了虾体对低氧胁迫环境的抵抗力。
总之,饲料中添加适量的锰和硒,有利于提高中华米虾和日本沼虾抗氧化酶的活性,增强机体对环境胁迫的抵抗力,实现健康养殖。本研究创新之处在于将营养与免疫联系起来,把生理和生态结合到一起,开拓思路,充分将各方面研究融会贯通,全面而综合地分析问题,从而为解决问题提供参考。