东乡野生稻内生真菌L99和S108次级代谢产物研究

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东乡野生稻(Oryza rufipogon Griff.)是1978年在江西省东乡县所发现的目前世界上纬度最高的野生稻,具有抗寒、耐旱、耐瘠、抗虫、免疫矮缩病等优良抗逆品质。本论文以实验室前期所获得的东乡野生稻内生真菌L99和S108为研究对象,对其进行形态学和分子生物学分类鉴定,最终将菌株L99鉴定为Sarocladium oryzae,S108菌株鉴定为Chaetomium globosum。随后采用固态发酵的培养方式,获得乙酸乙酯浸提物,再利用硅胶柱层析、葡萄糖凝胶柱层析(Sephadex LH-20)、薄层色谱分析(TLC)以及高效液相色谱分析等分离手段,追踪分离获得化合物。结合高分辨质谱和核磁共振谱等现代色谱技术对分离纯化得到的化合物进行结构解析与鉴定,最后评价这些化合物对黑色素瘤B16细胞活力的影响,得到以下结论:从菌株L99乙酸乙酯粗提物中分离纯化得到10个化合物,鉴定其分别为:脱氧胸腺嘧啶核苷(1)、2’-O-甲基腺苷(2)、2’-脱氧尿苷(3)、脲嘧啶核苷(4)、腺嘌呤核苷(5)、(E)-9-methyloctadec-9-enoic acid(6)、麦角甾醇过氧化物(7)、烟曲霉酸(8)、(9Z)-glycerin-1-monooleate(9)、酞酸二丁酯(10)。从菌株S108乙酸乙酯粗提物中分离纯化得到7个化合物,鉴定其分别为:邻苯二甲酸二辛酯(11)、6-Hydroxymellein(12)、Chaetomugilin D(13)、Chaetomugilin S(14)、Chaetoviridins A(15)、球毛壳素A(16)、6-O-demethyl-5-deoxyfusarubin(17)。在黑色素瘤B16细胞生存活力的试验中,发现化合物酞酸二丁酯(10)和6-Hydroxymellein(12)对黑色素瘤B16细胞活力影响较大,并在10μM时对黑色素瘤B16细胞的杀伤能力最强。
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