人参根际土壤真菌与内生真菌的多样性及人参皂苷生物催化活性菌株的筛选

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人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是五加科人参属多年生的草本植物,是我国传统名贵中药材,具有大补元气、益肺、生津、安神等功效,在《神农本草经》中被列为上品,是常用的滋补强壮药,近年来,越来越被人们广泛应用。本文对人参的根际土壤真菌及内生真菌进行了分离和纯化,针对人参根际土壤及内生真菌的物种多样性开展系统研究,明确主要真菌种类资源和区系分布规律,分离获得有经济价值的真菌种类资源,并利用筛选获得的活性菌株对人参主要活性物质人参皂苷类成分进行转化,为人参根际土壤真菌和内生真菌的资源利用以及人参稀有人参皂苷的规模化生产奠定基础。于2009年的7-10月间在辽宁省的桓仁,吉林省的集安、靖宇、抚松等药材产区采集人参及人参根际土壤样品。通过真菌的分离和培养,共获得真菌菌株105株,分别编号为IBE023001-105,经形态学鉴定分属于16属42种。分离到的部分真菌种类是重要的人参病原菌,如Cylindrocarpon didymum,C. destructans、Fusarium oxysporum和F. solani等。同时研究得到两株重要的人参内生菌,莫勒接霉Zygorhynchus moelleri和灰绿犁头霉Absidia glauca。对分离获得的105株真菌进行了人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd和Rg1的微生物转化试验。经TLC检测分析,初步证明有24株真菌对人参皂苷具有转化作用。进一步采用HPLC检测,筛选出5株能高效转化人参皂苷Rb1为Rd的真菌,其中4株真菌能将人参皂苷Rb1转化为Rg3,5株真菌能将人参皂苷Rb1转化为Rh2,4株真菌能将人参皂苷Rd转化为Rg3和Rh2。研究发现,莫勒接霉Zygorhynchus moelleri(菌株IBE023087)和灰绿犁头霉Absidia glauca(菌株IBE023105)对人参皂苷Rb1具有专一转化活性,能够高效转化为人参皂苷Rd,有望应用于医药业Rd的规模化生产。
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