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研究背景及目的:热休克蛋白(HSPs)作为一种含量极其丰富同时在生物进化过程中高度保守的蛋白质家族,当细胞内环境紊乱或受到外界刺激时会显著上调以增强细胞应激能力及适应能力。热休克蛋白90(HSP 90)作为HSPs家族中的成员之一,在众多生理及病理过程中均起到重要的作用,近些年随着HSP 90抑制剂的研究逐步深入,目前以17-AAG为代表药物的格兰德霉素衍生物已经进入诸多血液病及实体瘤单药治疗II期临床实验。而HSP 90在心血管领域的作用机制也在逐步深入进行,目前已有研究表明,HSP90抑制剂17-AAG对于稳定动脉粥样硬化斑块有一定的作用,相关的研究也在肺动脉高压及腹主动脉瘤中看到了一定的成效,但其在主动脉夹层发生发展过程中的作用目前尚无报道。主动脉夹层(AD)最为危重的急症之一,尽管目前的诊疗水平已有了明显提升,但因夹层急性破裂而导致的院外死亡率仍居高不下,目前对于主动脉夹层的机制性研究认为,除了弹力纤维的退行性变外,血管平滑肌细胞(VSMCs)生物学特性的改变是参与大动脉疾病中的重要部分,因此,针对平滑肌细胞的机制研究也正在逐步成为了解大动脉疾病的突破点。本实验首先旨在明确HSP90在AD疾病发生发展中血清及组织的表达水平并推测其是否与平滑肌细胞表型转化存在一定的相关性,接下来在细胞水平明确HSP90抑制剂是否对VSMCs的表型转化具有影响,同时验证其对VSMCs生物学特性的影响,最后在AD的动物模型中应用HSP90抑制剂观察其对疾病的治疗效果。方法:收集20例从2014年9月至2015年3月在长海医院心血管外科因急性Stanford A型胸主动脉夹层行急诊手术患者的血清及术中胸主动脉组织,同期选取20例志愿者血清及8例心脏移植供体正常主动脉组织作为对照。液氮标本用于提取组织RNA行定量PCR、提取组织蛋白行Western blot;多聚甲醛固定后的标本行常规染色及免疫组化染色。胶原酶消化法获得SD大鼠原代胸主动脉平滑肌细胞,通过PDGF-bb诱导大鼠VSMCs发生生物学性状的改变,用HSP90抑制剂17-DMAG进行干预,对VSMCs的生物学功能进行检测,包括平滑肌细胞表型相关标志物RNA及蛋白水平的改变、CCK 8法测定增殖、平板划线法测定迁移、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。选取60只4周龄雄性FVB小鼠,通过β-BAPN喂养联合血管紧张素II建立主动脉夹层小鼠模型,并利用HSP90抑制剂17-DMAG干预模型,通过建模成功率及死亡率的比较以期获得HSP90抑制剂是否能防治主动脉夹层,并对不同组中主动脉组织提取组织蛋白行Western blot;多聚甲醛固定标本行常规HE染色及弹力纤维染色。结果:1、大体标本中,主动脉夹层患者主动脉组织中HSP90明显升高,且表达定为于血管壁中膜层平滑肌细胞,并且推测HSP90的表达升高与平滑肌细胞合成型标志物呈正相关;2、在细胞水平上,HSP90抑制剂17-DMAG能抑制由PDGF-bb诱导的平滑肌细胞的表型转化,同时能抑制由PDGF-bb诱导的平滑肌细胞增殖、迁移及周期改变。3、动物模型水平,HSP90抑制剂17-DMAG能显著降低胸主动脉夹层的死亡率,并且在组织学上明显缓解了动脉血管壁结构的破坏;同时在蛋白水平证明17-DMAG能缓解在主动脉夹层过程中平滑肌细胞的表型转化。结论:HSP90抑制剂17-DMAG能通过抑制平滑肌细胞表型转化减轻主动脉组织病变并减少AD模型的死亡率,从而可能成为防治主动脉夹层的潜在药物。