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红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)是我国东北部林区的乡土树种,红松籽仁富含多种人体必须的营养成分,具有很高的营养价值。蛋白质是一类功能性大分子物质,具有多方面的生理功能。红松松仁含有丰富的蛋白质,其蛋白质含量达到20%以上。本论文以红松松仁蛋白为研究对象,对其提取工艺和分离方法进行了研究。并且通过动物试验,检验了松仁蛋白的降脂功能。本论文以红松松仁为原料,采用索氏提取法对从松仁中提取脱脂粉的工艺进行了研究,分别考察了提取时间、提取温度和料液比对松仁脱脂率的影响,在此基础上进行了正交试验,优化后的提取条件是提取时间为8h、提取温度为65℃、料液比为1:25;在最优条件下,得到松仁脱脂率为62.1%。然后采用超声波辅助碱提酸沉法对从松仁脱脂粉中提取蛋白质的工艺进行了研究,分别考察了提取温度、超声时间、pH值和料液比对蛋白质提取率的影响,在此基础上进行了响应面试验,优化后的提取条件是提取时间为66.9min、提取温度为47.3℃、pH值为9.24、料液比为1:29.25;在最优条件下,得到松仁蛋白的提取率为89.47%。根据Osborne的分类和命名,即将蛋白质分为水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白,所以采用顺序提取法即依次提取水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白。使用提取的水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白作为受试剂,将小鼠随机分为11组,除1组为普通对照组外,其他10组给予高脂饲料,每周称重一次,建立肥胖模型。肥胖模型建立后,普通对照组和高脂对照组分别灌胃生理盐水(1.2g/kg bw),红松松仁水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白低、中、高剂量组分别灌胃0.6g/kg bw、1.2g/kg bw和2.4g/kg bw的相应蛋白。连续4周后,分别测定小鼠血清总胆固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)、血清低密度脂蛋白(LDL-C)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)、肝脏总胆固醇(TC)、肝脏甘油三脂(TG)、肝脏丙二醛(MDA)及肝脏脂褐质(LP)的含量。试验结果表明,与高脂对照组相比,红松松仁水溶蛋白能显著降低血清TC水平(P<0.05)、血清TG水平(P<0.05)、血清LDL-C水平(P<0.05)、肝脏TC水平(P<0.01)、肝脏TG水平(P<0.01)、肝脏MDA水平(P<0.01)和肝脏LP水平(P<0.01),而能极显著性的升高血清HDL-C水平(P<0.01);红松松仁盐溶蛋白能显著降低血清TC水平(P<0.01)、血清TG水平(P<0.01)、血清LDL-C水平(P<0.05)、肝脏TC水平(P<0.01)、肝脏TG水平(P<0.01)、肝脏MDA水平(P<0.01)和肝脏LP水平(P<0.01),而能极显著性的升高血清HDL-C水平(P<0.01);红松松仁醇溶蛋白能显著降低血清TC水平(P<0.01)、血清TG水平(P<0.01)、血清LDL-C水平(P<0.05)、肝脏TC水平(P<0.01)、肝脏TG水平(P<0.01)、肝脏MDA水平(P<0.01)和肝脏LP水平(P<0.01),而血清HDL-C水平(P<0.01)显著升高。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清总胆固醇(TC)降低了15.5%、21.4%和28.8%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清总胆固醇(TC)降低了13.9%、18.8%和23.9%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清总胆固醇(TC)降低了17.1%、24.1%和30.8%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清甘油三酯(TG)降低了4.4%、12.5%和17.6%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清甘油三酯(TG)降低了2.9%、8.8%和13.2%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清甘油三酯(TG)降低了8.1%、14.0%和19.1%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低了22.1%、27.7%和31.4%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低了16.3%、24.4%和27.9%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低了29.1%、32.6%和38.4%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高了12.4%、24.4%和31.5%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高了8.5%、18.6%和27.6%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高了17.2%、28.7%和36.9%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏总胆固醇(TC)降低了13.9%、24.7%和35.3%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏总胆固醇(TC)降低了7.9%、16.8%和26.3%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏总胆固醇(TC)降低了17.9%、29.9%和39.4%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏甘油三酯(TG)降低了10.3%、21.3%和29.4%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏甘油三酯(TG)降低了6.2%、16.5%和25.6%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏甘油三酯(TG)降低了13.9%、25.9%和31.3%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏丙二醛(MDA)降低了5.6%、19.3%和30.3%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏丙二醛(MDA)降低了3.2%、12.6%和23.8%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏丙二醛(MDA)降低了8.4%、22.7%和33.3%。水溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏脂褐质(LP)降低了12.3%、24.6%和35.9%;盐溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏脂褐质(LP)降低了5.1%、19.8%和31.4%;醇溶蛋白低剂量组、中剂量组和高剂量组分别使小鼠肝脏脂褐质(LP)降低了16.5%、27.2%和39.5%。研究结果表明,红松松仁水溶蛋白、盐溶蛋白和醇溶蛋白均能够起到降血脂的作用,并且对小鼠脂质代谢具有积极的调节作用,起到一定的降脂作用。