槲皮素对肝星状细胞活化、增殖、凋亡及PPAR-γ表达的影响

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目的:观察槲皮素(Quercetin)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖、凋亡和PPAR-γmRNA的表达的影响,以探讨槲皮素抗肝纤维化的作用机制。方法:实验分为5组:第一组为空白对照,即肝星状细胞非处理组;第二组至第五组在活化的肝星状细胞中分别加入不同剂量槲皮素,使槲皮素终浓度分别为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L。每组加药后继续孵育24小时。用MTT法观察槲皮素对肝星状细胞增殖的影响;AOEB染色观察每组细胞凋亡情况;高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内甘油三酯的含量;RT-PCR法检测每组肝细胞α-SMA、PPAR-γmRNA水平的表达,从而确定槲皮素对肝星状细胞影响的量效关系。将40μmol/L的槲皮素与活化肝星状细胞共同处理12、24、48小时,再分别检测各组细胞α-SMA、PPAR-γmRNA水平的表达;MTT,AOEB染色,检测各组细胞的增殖,凋亡情况;高效液相色谱法检测细胞甘油三酯含量,作出时效关系。实验数据以±s表示,计数资料用百分比(%)表示,两组间比较采用χ2检验,用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析,以P﹤0.05作为差异显著性标准。结果:经不同浓度的槲皮素(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)处理肝星状细胞24小时,结果显示:Quercetin对自活化肝星状细胞增殖有明显抑制作用,AOEB染色表明,凋亡细胞增多。槲皮素呈浓度依赖性的增加自活化肝星状细胞内TG,同时呈浓度依赖性的减少α-SMAmRNA的表达、增加PPAR-γmRNAA的表达。将40μmol/L的槲皮素与自活化肝星状细胞共同处理12、24、48小时,结果显示:细胞??油三酯含量呈时间依赖性增加;槲皮素呈时间依赖性的减少肝星状细胞的增殖,增加凋亡,同时呈时间依赖性的减少α-SMA的表达、增加PPAR-γmRNA的表达。结论:1、槲皮素能减少肝星状细胞的活化、增殖,增加凋亡。2、槲皮素能增加细胞内甘油三酯含量、可能与通过上调PPAR-γ表达有关。
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