伴随着分子生物学研究的深入,Western Blot、染色质免疫共沉淀及免疫共沉淀技术已成为分子生物学研究中重要的手段,其共同基础是需要制备高效价抗体。因此,抗体制备成为开展这些研究至关重要的一个基础工作。以重组蛋白作为抗原是目前常用制备抗体的方式。本论文旨在以多种表达系统来表达及制备我们的目的蛋白,主要内容如下:1、成功克隆6种酵母成分蛋白基因到原核表达载体中;2、确定具有明显诱导表达的菌株,并根据其表达形式,采用相应的方式进行纯化,制备出相应的重组蛋白;3、用Western Blot检测经上述重组蛋白免疫的兔子血清,检测结果显示,我们已获得了部分蛋白的抗体;4、将在大肠杆菌中难以表达的蛋白Epl1,克隆到真核表达载体pEMBLyex4中,初次尝试在真核表达系统表达目的蛋白;同时,也进行了不同形式的酵母RPL36B蛋白的表达;5、研究开发无细胞蛋白表达系统。尝试构建出有效的表达系统新形式,进行快速批量表达蛋白,并表达在E.coli中难以表达的蛋白,到目前没有得到预期结果。我们试图在多种表达系统中进行蛋白表达,一方面生产重组蛋白作为抗原来制备我们需要的抗体,另一方面我们尝试着建立无细胞蛋白合成平台,为今后的研究作技术储备。