纳米金改善结肠癌细胞的耐药性及其机制的研究

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目的:观察纳米金(gold nanoparticles, GNPs)对奥沙利铂(Oxaliplatin, L-OHP)抗耐药结肠癌细胞(COLO 205/L-OHP)的影响并初步探讨其相关机制。方法:首先根据化学合成法制备纳米金,并用紫外-可见吸收光谱和透射电子显微镜鉴定。实验第一步通过MTT比色法、PCR、Western blot分别检测耐药结肠癌细胞COLO 205/L-OHP对药物L-OHP的敏感程度、MDR和MRP1基因表达以及P-gp蛋白的表达,并与正常结肠癌细胞COLO 205/S对比;第二步将纳米金联合奥沙利铂对COLO 205/L-OHP进行处理,采用MTT法和流式细胞术分别检测增殖抑制率和凋亡率;第三步用不同浓度的纳米金处理COLO 205/L-OHP,通过ELISA检测细胞培养液内b-FGF的浓度,Western blot检测细胞内b-FGF、Bcl-2蛋白的表达量。结果:纳米金的最大吸收峰在520 nm处,粒径约10 nm大小;在浓度为1.5μg/mL的L-OHP中,COLO 205/L-OHP细胞增殖抑制率明显低于COLO 205/S(P<0.05);与COLO 205/S目比,COLO 205/L-OHP耐药基因MDR、MRP1以及P-gp表达增多;联合用药组COLO 205/L-OHP细胞增殖抑制率、凋亡率高于单用奥沙利铂组(P<0.05)。COLO 205/L-OHP培养液内b-FGF以及细胞内所表达的b-FGF、Bcl-2含量与COLO 205/S相比明显增高(P<0.05),单纯纳米金对COLO 205/L-OHP细胞增殖无抑制作用(P>0.05),但是经纳米金处理后,COLO 205/L-OHP细胞中b-FGF和Bcl-2含量明显减少,且具有浓度依赖性。结论:纳米金能够降低COLO 205/L-OHP细胞内b-FGF含量,使细胞内抗凋亡蛋白表达减少,增加奥沙利铂毒性作用,改善耐药情况。
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