奶牛的一生伴随着多个妊娠周期,每个周期乳腺上皮细胞都经历增殖、分化和凋亡的过程,研究乳腺上皮细胞增殖对于提高奶牛产奶量是一个重要的保障措施。有研究表明,在饲料中添加杜仲提取物能够促进奶牛泌乳,但杜仲提取物对乳腺发育的研究还未见报道。本研究以小鼠为模型,将4周龄小鼠随机分成3个组:杜仲高剂量组(5‰)、杜仲低剂量组(1‰)和空白对照组。在妊娠期及哺乳期母鼠的日粮中添加杜仲提取物,并对断奶后的仔鼠饲喂相同的日粮。利用H&E染色和q-PCR(定量PCR)技术,研究杜仲提取物对小鼠乳腺形态结构和增殖的影响,获得的主要结果如下:1.对妊娠17 d的小鼠乳腺组织进行H&E染色,结果表明,相对于对照组,低剂量组和高剂量组的腺泡形态更明显,导管壁增厚。q-PCR结果表明,IGF-2基因在低剂量组和高剂量组妊娠母鼠乳腺中的表达量均不同程度上调(P<0.001);细胞周期蛋白D1也有相同的变化趋势,表明日粮中添加杜仲提取物能够促进妊娠期小鼠乳腺的发育。通过对比各组仔鼠的日增重,发现高剂量组仔鼠在泌乳前期日增重显著大于对照组。H&E结果表明,相比于对照组,高剂量组和低剂量组母鼠的乳腺在泌乳初期出现更多的腺泡和更明显的腺泡结构。2.对断奶后的仔鼠饲喂至6周龄和8周龄后进行全组织染色,结果显示:6周龄高剂量组和低剂量组小鼠发育出明显的末端芽结构(Terminal end bud,TEB),导管延伸速度比对照组快。8周龄时,高剂量组小鼠乳腺已发育至性成熟的状态,导管增殖发育速度明显快于低剂量组和对照组。q-PCR结果表明,小鼠乳腺中ERα的表达水平升高(P<0.001),下游基因AREG的表达量也显著上调(P<0.01),表明杜仲提取物在青春期具有促进细胞增殖的作用。3.奶牛乳腺上皮细胞系(BMECs)的体外试验表明,随着杜仲提取物浓度的增加,处于Ed U增殖状态的阳性细胞比例也在增加,500 mg/m L组的细胞增殖数显著高于对照组(P<0.01)。综上所述,本研究通过对妊娠期和青春期乳腺发育的表型和分子机制的初步研究,发现杜仲提取物能够促进泌乳期乳腺上皮细胞的增殖。并通过奶牛乳腺上皮细胞系的体外研究进一步阐述了杜仲提取物促进乳腺上皮细胞增殖的作用,为杜仲在畜牧生产中的应用提供了理论基础。