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第一部分 油酸在大网膜来源的脂肪细胞和胃癌细胞间的转运以及脂肪细胞对胃癌细胞侵袭能力的影响目的:检测经与脂肪细胞共培养后胃癌细胞的脂肪酸谱和侵袭能力的改变。方法:从良性病例腹部手术中获取大网膜组织,通过机械和酶消化法分离脂肪细胞和前脂肪细胞,鉴定细胞活性,并分别与胃癌细胞系AGS细胞系,MKN-45细胞系建立共培养体系,利用基质胶侵袭实验检测共培养前后胃癌细胞系侵袭能力的改变,通过脂肪酸转移实验检测脂肪酸在脂肪细胞和胃癌细胞间的转移,利用气相色谱-质谱联用法检测共培养前后胃癌细胞脂肪酸谱的改变。结果:基质胶侵袭实验表明,胃癌细胞分别经与大网膜来源的脂肪细胞和前脂肪细胞共培养后,与脂肪细胞行共培养的AGS细胞系和MKN-45细胞系较与前脂肪细胞共培养的胃癌细胞系,侵袭能力明显增强,通过荧光成像检测,可直接观察到与脂肪细胞的共培养体系中,脂肪细胞释放脂肪酸并被体系中的胃癌细胞摄取,气相色谱-质谱联用法结合脂肪酸含量分析表明共培养后胃癌细胞中油酸含量较共培养前明显增加。结论:脂肪细胞通过共培养能明显增强胃癌细胞的侵袭能力,并促进油酸从脂肪细胞向胃癌细胞的转运。第二部分油酸通过调控P13K-Akt通路影响胃癌细胞在体内体外的侵袭能力目的:检测油酸对胃癌细胞PI3K-Akt信号通路的调节,以及对胃癌细胞侵袭能力的影响。方法:运用Western Blot方法检测不同浓度油酸作用下,胃癌细胞系AGS细胞系和MKN-45细胞系PI3K-Akt通路的激活情况以及MMP-2的表达水平;通过基质胶侵袭实验检测不同浓度油酸作用下,胃癌细胞系AGS细胞系和MKN-45细胞系侵袭能力的改变,通过鸡胚尿囊膜侵袭实验(chick CAM invasion assay)检测油酸对MKN-45细胞系体内侵袭能力的改变;Western Blot检测PI3K抑制剂存在与否对油酸介导的细胞侵袭能力、MMP-2表达水平改变的影响。结果:基质胶侵袭实验表明,AGS细胞系在25uM-50uM油酸作用下侵袭能力显著增强,MKN-45细胞系在25uM-100uM油酸作用下侵袭能力显著增强,CAM实验显示油酸能显著增强MKN-45细胞系体内侵袭能力。Western Blot显示油酸能激活PI3K-Akt通路,提高PI3K、磷酸化Akt的表达,提高MMP-2在MKN-45细胞系内的表达水平。PI3K抑制剂LY294002能显著抑制由油酸介导的细胞体外侵袭能力的增强和MMP-2表达水平提高。结论:油酸能激活胃癌细胞系PI3K-Akt通路,随之促进胃癌细胞的侵袭能力。