IFN-α-1b对TNF-α诱导NF-κB活性及EJ细胞凋亡的影响

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目的探讨联合使用TNF-α、IFN-α-1b对抗凋亡因子NF-κB及其抑制因子IκB-α的影响,同时研究联合或者单独使用TNF-α、IFN-α-1b对膀胱癌细胞系EJ细胞的细胞毒效应。方法应用Western blot蛋白印迹法去检测IκB-α在不同时间段细胞内浓度变化。应用激光扫描共聚焦(CLSM)对NF-κB p65进行定位显示。应用改良MTT比色法去检测EJ细胞的存活状态。结果单独使用IFN-α-1b组和IFN-α-1b联合TNF-α组之间对EJ细胞生长抑制率的比较有非常显著统计学意义(p=0.001);单独使用TNF-α组和TNF-α联合IFN-α-1b组之间有显著统计学意义(p=0.022)。在两种联合作用情况下均可明显提高EJ细胞的生长抑制率,但以40ng/ml的TNF-α加入2ng/ml的IFN-α-1b时对EJ细胞的生长抑制作用最明显。IκB-α在TNF-α诱导下随着时间的延长,其细胞内含量呈下降趋势;NF-κBp65成相反表达。加用IFN-α-1b后可翻转二者的表达情况。结论IFN-α-1b抑制TNF-α诱导下的NF-κB活性表达并增强TNF-α对膀胱癌EJ细胞株的细胞毒效应。大剂量、长时间使用TNF-α后,其抑制细胞生长的作用占优势。联合使用TNF-α和IFN-α-1b时可明显提高EJ细胞的生长抑制率,这和IFN-α-1b阻断NF-κB活性释放,增强TNF-α促细胞凋亡作用有关。应该引起注意的是联用TNF-α和IFN-α-1b抑制EJ细胞时以较小剂量TNF-α加有效剂量的IFN-α-1b效果最为明显,并以间隔最少45min使用为宜。
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