目前,猪繁殖与呼吸综合征依然是世界养猪业的一大难题。猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组长约15KB,为单正链RNA病毒,它含8个开放阅读框,编码nsp7蛋白的基因是ORF1,该基因位于基因组的5’端。目前的研究表明NSP7蛋白是一个可用于检测PRRSV血清抗体的理想蛋白,其具备以下几个特征：NSP7蛋白以可溶性蛋白的方式进行表达,利于蛋白的表达与纯化。在检测分析大量样本时,能够提供足够的抗原；NSP7蛋白在同一基因型中有很高的同源性；PRRSV感染后机体内产生的抗nsp7抗体的水平很高,可持续到202天以后。设计引物,利用RT-PCR的方法从PRRSV BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将扩增得到的产物连接至表达载体pET28a。将重组质粒pET28a-nsp7转化至BL21(DE3)细菌中,鉴定并测序。进行IPTG诱导表达后,表达结果用SDS-PAGE分析。结果表明成功表达了分子量大小约为33KDa的重组蛋白。表达蛋白用Ni-NTA树脂进行纯化,Western blot分析,表明重组蛋白具有良好的抗原性。以重组nsp7蛋白为检测抗原,建立了检测PRRSV抗体的ELISA试剂盒。对试剂盒进行了符合研究,比较NSP7-ELISA和IDEXX试剂盒的检测结果,二者的阳性符合率为87.59%,阴性符合率为76%,重复率为86.9%,表明NSP7-ELISA有很高的敏感性和特异性。本实验成功构建了pET28a-nsp7原核表达载体,并利用大肠杆菌表达系统使目的蛋白高效表达,得到大小约为33kDa的重组蛋白；建立了重组蛋白纯化方法,并以NSP7蛋白为抗原建立了检测猪血清PRRSV抗体的ELISA检测方法。