青鳉属(Oryzias)是一类广泛分布于亚洲东部、东南部中南半岛及印度尼西亚群岛的小型鱼类,具有体型小、产卵多、繁殖周期短等特点,同时由于其易观察受精过程、胚胎发育快、对水质敏感等优点,因而被大量应用于发育生物学、毒理学等领域。弓背青鳉(O.curvinotus)因其背部从外观看呈隆起的弓状而得名,是一种可生活于广温广盐,热带与亚热带,无洄游性的河口上层小型鱼类,团队近期利用分子标记揭示出弓背青鳉群体间存在明晰的遗传距离。本研究以三亚(SY)、高桥(GQ)、饶平(RP)三个不同地理群体的弓背青鳉为研究对象,优化了弓背青鳉孵化和早期繁养方法,测定了三个不同地理群体弓背青鳉的形态学数据,分析了弓背青鳉三亚群体雌雄性腺转录组,并探究了养殖温度对不同地理种群弓背青鳉生长发育的影响,为弓背青鳉的繁殖和资源保护提供了理论指导。相关主要结果如下:一、本实验所用弓背青鳉分别采自三亚、高桥、饶平,记录各采样点平均水温、盐度等相关参数,结果显示三亚群体年平均水温27.5℃显著高于高桥和饶平。分别以三个群体的样本作为亲本,优化弓背青鳉室内孵化和早期繁养方法。饶平、高桥、三亚三个群体平均产卵量分别为23.88、22.34和24.64;三个群体孵化率分别为87.04%、86.33%和91.08%;三个群体生存率分别为71.20%、81.36%、88.52%。使用弓背青鳉性别特异性引物Ocsex-F和Ocsex-R进行三个群体的性别鉴定,结果表明在高桥和饶平两个群体中遗传雄性弓背青鳉中扩增出长度分别为959bp和656bp两条清晰的DNA条带,在雌性个体中仅扩增出959 bp的单一条带;而在三亚群体中遗传雄性和遗传雌性均只能扩增出959 bp的单一条带。二、对弓背青鳉三亚、高桥、饶平等3个群体共计131尾进行形态学差异比较。测量弓背青鳉囊胚期鱼卵,发现3个群体间横径、竖径均存在P<0.001的显著性差异,卵径大小的横径、竖径均存在RP>GQ>SY的结果。本研究对共计131尾弓背青鳉三个群体的可数性状和可量性状进行了多元统计分析:3个群体的弓背青鳉在体长/最长背鳍条这一指标上均出现明显的雌雄分化。对5个可数性状和13个体长/可量性状平均值进行聚类分析表明饶平和高桥群体在外部形态上更为相似。主成分分析前三项贡献率分别为68.14%、8.35%和6.41%,累计贡献率为82.70%。多元统计显示饶平和三亚群体的差异较大,高桥和饶平群体的差异较小。通过计算各项指标的变异系数可知,三个群体的形态差异是种内不同地理种群的差异,这种差异还达不到亚种水平。三、对弓背青鳉三亚群体雌雄性腺转录组分析后,我们随机挑选了21个差异表达基因进行q RT-PCR验证,结果表明,差异表达量存在一定差异,表达量差异的总体趋势呈现一致。dmy基因(DM domain gene on Y chromosome)是弓背青鳉的性别决定基因,但在三亚群体雄性性腺转录组文库中未能调取dmy基因,与实验室已有的其他群体雄性性腺转录组可调取dmy基因的结果不一致。这一研究结果为进一步探究弓背青鳉性别决定基因和探究弓背青鳉性别决定及性别分化都具有重要意义。四、对饶平、高桥、三亚3个地理群体不同温度下的弓背青鳉的出膜时间进行统计。在22～30℃范围内,同一群体的出膜时间随着温度的升高逐渐减少。相同温度下,弓背青鳉的大量出膜时间在3个群体中存在差异,分别为SY>GQ>RP。3个群体的弓背青鳉出膜仔鱼分别在22℃、26℃和30℃恒温下进行养殖发现:在22℃下,三亚和高桥群体出膜10d后大量死亡,极少数(3～5%)可继续生长,饶平群体10d后可生长,但生长速率缓慢;在恒温26℃和30℃下三个群体均可正常生长,且生长速率呈现RP>GQ>SY的趋势。