基于纳米线电极的细胞电转染装置及其应用

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzy19900924
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近年来,细胞免疫治疗尤其是CAR-T技术成为肿瘤治疗领域的研究热点。目前CAR-T细胞治疗采用的基因转染方法多为病毒转染法,该方法在操作上繁琐,并且存在随机插入导致癌变的潜在风险,安全性问题成为病毒转染法的固有缺陷。因此,寻找更加安全、并且便捷易操作的转染方法是CAR-T技术仍需要解决的重要问题。电转染法作为一种物理转染法,理论上能对各种细胞进行转染,尤其是对于一般方法难以转染的细胞系和原代细胞,采用电转染法具有较明显的优势。但是目前应用广泛的商品化电转仪,多采用高达200V以上的电压,并需要特殊的电转缓冲液辅助。高电压作用下会产生较强的热效应和电化学效应,导致细胞死亡率高。鉴于纳米线能够在尖端产生较强的局部电场,本研究创新性地采用表面具有纳米线结构的材料作为电转染电极,希望在相对低电压的条件下产生一定的转染效果。在本研究中,我们首先优化了以铜作为基底热氧化制备CuO纳米线的工艺条件,并自行构建了一套细胞电转染装置。然后,以表达荧光素酶的质粒pGL3为研究模型,验证了自行构建的细胞电转染装置对细胞进行转染的可行性,并对CHO、RAW264.7、Jurkat等细胞系的转染条件进行了初步的摸索。研究结果显示,本实验室自行设计的细胞电转染装置能够在低电压(2-10V)条件下实现对细胞的电转,虽然目前达到的转染效率仍不够理想,但是本研究为细胞电转染装置的设计提供了新的方向和思路,并奠定了一定的理论基础。
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